高基質(zhì)利用率和高生物活性成分靈芝雜交菌株育種.pdf

1、靈芝作為我國(guó)醫(yī)藥寶庫(kù)中的瑰寶，自古就有“仙草”、“瑞草”之稱。由于靈芝孢子難于在人工條件下萌發(fā)，無(wú)法獲得靈芝育種所需的單核菌株，因此鮮見(jiàn)用孢子雜交的方法進(jìn)行靈芝新品種選育。本研究利用原生質(zhì)體單核化技術(shù)，成功獲得了靈芝的雜交菌株，經(jīng)過(guò)液體培養(yǎng)手段選育了具有高基質(zhì)利用率和高生物活性成分的雜交靈芝菌株。
　　本論文通過(guò)對(duì)27株靈芝菌株的菌絲體的生長(zhǎng)速度、漆酶和羧甲基纖維素酶相對(duì)活性進(jìn)行測(cè)定，同時(shí)對(duì)進(jìn)行栽培實(shí)驗(yàn)，分別建立了生長(zhǎng)速度、漆酶和

2、羧甲基纖維素酶相對(duì)活性與子實(shí)體產(chǎn)量的關(guān)系，運(yùn)用多元線性回歸分析法確定了菌絲體的生長(zhǎng)速度、漆酶相對(duì)活性和羧甲基纖維素酶相對(duì)活性對(duì)產(chǎn)量的貢獻(xiàn)力。結(jié)果發(fā)現(xiàn)它們與產(chǎn)量有較高的線性相關(guān)；用這些指標(biāo)來(lái)預(yù)測(cè)菌株的產(chǎn)量和雜交優(yōu)勢(shì)，可以有效減少或避免進(jìn)行繁瑣、周期較長(zhǎng)的出菇實(shí)驗(yàn)；用建立的模型來(lái)選擇靈芝雜交育種中的親本，具有簡(jiǎn)便、快速等優(yōu)點(diǎn)，可以有效縮短雜交育種的周期。
　　通過(guò)篩選試驗(yàn)，G0119、G0130和G0154被選出作為親本菌株。通過(guò)原生

3、質(zhì)體單核化獲得了108株靈芝的單核菌株，對(duì)單核菌株進(jìn)行交配型測(cè)定，發(fā)現(xiàn)存在6種不同交配型的單核菌株。以此為材料進(jìn)行雜交育種，獲得了不同于親本的63株雜交菌株。
　　進(jìn)一步研究了單核菌株和63株雜交菌株的相對(duì)酶活的性質(zhì)，以及優(yōu)勢(shì)雜交菌株在液體培養(yǎng)過(guò)程中的生長(zhǎng)情況及對(duì)底物的利用率。通過(guò)拮抗反應(yīng)驗(yàn)證，證實(shí)63株雜交菌株是雜交菌株。利用液體培養(yǎng)的方法發(fā)現(xiàn)雜交菌株對(duì)纖維素的利用率高于親本菌株。雜29和雜62在液體培養(yǎng)中菌絲生物量較高。用Lo