高基質利用率和高生物活性成分靈芝雜交菌株育種.pdf

1、靈芝作為我國醫(yī)藥寶庫中的瑰寶，自古就有“仙草”、“瑞草”之稱。由于靈芝孢子難于在人工條件下萌發(fā)，無法獲得靈芝育種所需的單核菌株，因此鮮見用孢子雜交的方法進行靈芝新品種選育。本研究利用原生質體單核化技術，成功獲得了靈芝的雜交菌株，經過液體培養(yǎng)手段選育了具有高基質利用率和高生物活性成分的雜交靈芝菌株。
　　本論文通過對27株靈芝菌株的菌絲體的生長速度、漆酶和羧甲基纖維素酶相對活性進行測定，同時對進行栽培實驗，分別建立了生長速度、漆酶和

2、羧甲基纖維素酶相對活性與子實體產量的關系，運用多元線性回歸分析法確定了菌絲體的生長速度、漆酶相對活性和羧甲基纖維素酶相對活性對產量的貢獻力。結果發(fā)現(xiàn)它們與產量有較高的線性相關；用這些指標來預測菌株的產量和雜交優(yōu)勢，可以有效減少或避免進行繁瑣、周期較長的出菇實驗；用建立的模型來選擇靈芝雜交育種中的親本，具有簡便、快速等優(yōu)點，可以有效縮短雜交育種的周期。
　　通過篩選試驗，G0119、G0130和G0154被選出作為親本菌株。通過原生

3、質體單核化獲得了108株靈芝的單核菌株，對單核菌株進行交配型測定，發(fā)現(xiàn)存在6種不同交配型的單核菌株。以此為材料進行雜交育種，獲得了不同于親本的63株雜交菌株。
　　進一步研究了單核菌株和63株雜交菌株的相對酶活的性質，以及優(yōu)勢雜交菌株在液體培養(yǎng)過程中的生長情況及對底物的利用率。通過拮抗反應驗證，證實63株雜交菌株是雜交菌株。利用液體培養(yǎng)的方法發(fā)現(xiàn)雜交菌株對纖維素的利用率高于親本菌株。雜29和雜62在液體培養(yǎng)中菌絲生物量較高。用Lo