土壤中明串珠菌的篩選和明串珠菌產(chǎn)細(xì)菌素的研究.pdf

1、明串珠菌是一類進(jìn)行異型發(fā)酵的革蘭氏陽性、耐氧的乳酸細(xì)菌。明串珠菌的生存環(huán)境較為寬泛，經(jīng)常存在于自然生態(tài)環(huán)境中的綠色植物的地上部分和根部，但與需氧細(xì)菌和酵母相比數(shù)量相對較少。明串珠菌的篩選主要來源于植物及其發(fā)酵產(chǎn)品、乳制品和發(fā)酵肉制品，還未見有土壤中篩選明串珠菌的報道。
　　 本研究對青海省西寧市和河北省沽源縣金蓮山區(qū)林下土壤中的明串珠菌進(jìn)行篩選，通過一系列生理生化實(shí)驗(yàn)鑒定，得到兩株革蘭氏陽性、過氧化氫酶陰性、不形成芽孢、異型發(fā)酵

2、、橢球形成對或短鏈排列的明串珠菌。分別對其分類地位進(jìn)行了初步定位，結(jié)果西寧菌株為腸膜明串珠菌腸膜亞種，沽源菌株為假腸膜明串珠菌。然后基于16S rDNA序列的系統(tǒng)發(fā)育樹分析，準(zhǔn)確定位了沽源菌株的分類地位。結(jié)果表明該明串珠菌屬于假腸膜明串珠菌，菌株命名為kimshi005，其16S rDNA序列在GenBank中登錄號為GU130195。
　　 明串珠菌可以產(chǎn)生許多功能性物質(zhì)，細(xì)菌素即是其中之一。本研究用腸膜明串珠菌CGMCC1.

3、10327發(fā)酵產(chǎn)生細(xì)菌素，該細(xì)菌素對大腸桿菌DH 5α、金黃色葡萄球菌ATCC 6538P和藤黃微球菌ATCC 10240A均具有明顯的抑制作用。以大腸桿菌為指示菌確定了培養(yǎng)基組成、pH和接菌量對產(chǎn)細(xì)菌素影響。優(yōu)化的培養(yǎng)基組成為每1L中含酵母浸粉3.0 g、檸檬酸銨3.0 g、MnSO4·4H2O 0.039 g、乙酸鈉5.0 g、K2HPO4 2.0g、葡萄糖10.0 g以及吐溫-80溶液1.6 mL。接菌量為1[％]，培養(yǎng)基初始pH

4、6.2。非變性聚丙烯酰胺凝膠電泳后，定義了比移值Rf且比移值分別為0.272，0.502，0.630和0.917的四條條帶具有對大腸桿菌的抑菌活性而其余條帶沒有，故產(chǎn)生了4種不同分子量的細(xì)菌素。
　　 本研究意義在于從菌量很少的土壤中分離篩選明串珠菌并對其進(jìn)行鑒定。研究所用的方法，可為以后進(jìn)一步從土壤中或其他含菌量很少的條件下篩選出更多的明串珠菌打下基礎(chǔ)。同時，由于產(chǎn)細(xì)菌素菌株為天津自制辣白菜中新篩腸膜明串珠菌，研究該菌株產(chǎn)細(xì)菌