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1、利用大規(guī)模哺乳動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)生產(chǎn)具有醫(yī)用價(jià)值的生產(chǎn)因子、干擾素、激素、疫苗、單抗和酶等,已成為生物制藥高技術(shù)產(chǎn)業(yè)鏈的核心。由于哺乳動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程中,如CO2、乳酸、氨、尿素、吲哚等代謝廢物的積聚,抑制了哺乳動(dòng)物細(xì)胞的生長(zhǎng),大幅提高了哺乳動(dòng)物細(xì)胞的培養(yǎng)成本。如何及時(shí)去除這些代謝物,優(yōu)化哺乳動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)環(huán)境,進(jìn)而提高哺乳動(dòng)物細(xì)胞產(chǎn)率、降低動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)成本和生物制品的成本,是生物醫(yī)藥制品規(guī)?;a(chǎn)和普及亟待解決的問題,具有重要的應(yīng)用價(jià)值。
2、r> 針對(duì)上述問題,本論文選取Vero(非洲綠猴腎細(xì)胞)哺乳動(dòng)物細(xì)胞株為研究對(duì)象,通過細(xì)胞相對(duì)活性、生長(zhǎng)狀態(tài)變化、乳酸脫氫酶濃度以及細(xì)胞凋亡對(duì)納米級(jí)凹凸棒土(NATP)的生物學(xué)毒性進(jìn)行評(píng)價(jià),并對(duì)其與哺乳動(dòng)物細(xì)胞的作用機(jī)制進(jìn)行探索性研究。具體研究?jī)?nèi)容如下:
(1)納米級(jí)凹凸棒土制備方法研究。分別利用六偏磷酸鈉、鹽酸和聚丙烯酸鈉結(jié)合超聲方法對(duì)工業(yè)化用的凹凸棒土進(jìn)行二次分散提純,通過FTIR、TEM和Zeta電位對(duì)制備的納米級(jí)凹凸
3、棒土顆粒進(jìn)行評(píng)價(jià)。研究結(jié)果表明三種處理方法中,聚丙烯酸鈉分散獲得的凹凸棒土穩(wěn)定性最好,其次是六偏磷酸鈉分散處理凹凸棒土,穩(wěn)定性最不好的是鹽酸分散處理的凹凸棒土。
(2)納米級(jí)凹凸棒土細(xì)胞毒性研究。通過與納米級(jí)凹凸棒土共培養(yǎng)的Vero哺乳動(dòng)物細(xì)胞的生長(zhǎng)狀態(tài)、細(xì)胞相對(duì)活性、細(xì)胞的凋亡、DNA的電泳、及培養(yǎng)基中的乳酸脫氫酶的濃度變化等方面的實(shí)驗(yàn),對(duì)納米級(jí)凹凸棒土細(xì)胞毒性進(jìn)行研究。研究結(jié)果表明:在一定的濃度范圍內(nèi),納米凹凸棒土材料對(duì)細(xì)
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