基于釕配合物的光致電化學傳感器的制備.pdf

1、光致電化學生物傳感器作為一種新型的分析方法在生物樣品檢測中顯示出很大的潛力。電子檢測儀器的使用使光致電化學分析儀價格低廉、設備簡單。同時,與電化學發(fā)光方法一樣,光致電化學分析法激發(fā)與檢測分步進行,其在檢測靈敏度方面應具有與電化學發(fā)光相媲美的潛質。本論文主要是將光致電化學分析法應用于生物分子的檢測,研制出新型的光致電化學生物傳感器,實現(xiàn)了ATP、DNA和腫瘤細胞的高靈敏檢測,為早期的臨床診斷提供了基本的理論研究基礎。
　　 本論文

2、的主要內容有以下幾個方面:
　　 1、研究了一種ATP光致電化學傳感器,具有很好的靈敏度和選擇性。這種ATP特異性的傳感器是基于磁珠上引入的ATP適體與其互補鏈形成雙鏈DAN(ds-DNA)后,由于光電活性物質Ru(bpy)2(dppz)2+與ds-DNA具有很高的結合能力,可以嵌插到DAN的雙螺旋結構中,當ATP存在時,其與適體的結合能力遠大于DAN,使雙鏈DAN解旋,光電活性物質掉到溶液中,通過磁性分離后進行光電流檢測,達到

3、檢測ATP濃度的目的。在最優(yōu)的實驗條件下ATP濃度與光電流信號變化的線性范圍為6.0×10-7～1.0×10-5M,檢測限為1.3×10-7M(3σ)。并且其它三磷酸核苷對于ATP的檢測無影響,具有很高的選擇性。此方法對ATP的檢測結果理想。
　　 2、采用生物條碼放大技術,構建出一種高靈敏檢測癌細胞中ATP含量的光致電化學適體傳感器。該適體傳感器的高靈敏度歸功于生物條碼放大了檢測信號和高靈敏的光致電化學檢測技術,結合這兩種技術

4、,在優(yōu)化的最佳實驗條件下,實現(xiàn)了ATP的靈敏檢測,線性范圍為1.0×10-8～1.0×10-6M,該體系檢測限為3.2×10-9M(3σ)。另外,由于采用了適體技術,該體系對目標物具有很高的選擇性,其它蛋白質分子如GTP、UTP、CTP對目標物的檢測干擾很小,因此,實現(xiàn)了對癌細胞中ATP含量的定量檢測,且實驗結果理想?？傊?將生物條碼放大技術、適體技術以及納米技術的結合,提供了一種不僅能對ATP進行靈敏檢測的方法,若采用不同的適體時,還

5、可以實現(xiàn)對其它生物活性分子的檢測。
　　 3、基于DNA構象變化利用光致電化學方法檢測目標DNA。通過金硫鍵將光電活性物質標記的莖環(huán)DNA自組裝到納米粒子修飾的ITO電極表面。當目標DNA存在時,莖環(huán)被打開,光電活性物質遠離電極,光電流減小。在最優(yōu)的實驗條件下,檢測限達到3.7×10-11M(3σ)。為了提高此光電化學傳感器的靈敏度,采用了鏈置換循環(huán)放大反應,經(jīng)過多次的循環(huán),可以將信號放390倍,檢測限達到9.4×10-14 M