基于納米介孔二氧化硅可控制系統(tǒng)電致化學發(fā)光檢測生物分子.pdf

1、納米介孔二氧化硅具有孔徑分布均勻且窄,較高的比表面積,較高的孔隙率,表面富含活性羥基,可以在孔內(nèi)和孔外實現(xiàn)多種多樣的官能團化,以及可以任意調(diào)節(jié)二氧化硅粒子的形貌和良好的生物兼容性等特點,在藥物可控釋放方面有著廣泛的應(yīng)用前景。本文以納米介孔硅為主體,電致化學發(fā)光底物為客體負載于介孔硅孔道,生物適體分子為“孔帽”結(jié)合在介孔硅孔口,利用適體-蛋白質(zhì)分子之間的特異性識別,采用與適體分子相對應(yīng)的蛋白質(zhì)分子為外界生物刺激條件,建立了兩種新型的可控制

2、釋放系統(tǒng)。并對有機小分子吲哚羧酸的電致化學發(fā)光性質(zhì)進行了初步探討。主要內(nèi)容包括:
　　 1.基于適體分子為“孔帽”的納米介孔二氧化硅可控制釋放系統(tǒng)的研究以1,3,5-三甲苯為擴孔劑,采用嫁接法合成了尺寸均勻、高容量、表面官能團化的納米介孔二氧化硅球。選用兩條堿基序列不同的短鏈DNA為聯(lián)結(jié)劑固定于介孔硅孔口,采用適體DNA與聯(lián)結(jié)劑形成的雙螺旋結(jié)構(gòu)構(gòu)成“孔帽”,將客體分子Ru(bpy)32+負載于介孔孔道內(nèi),然后加入蛋白質(zhì)分子凝血酶

3、,由于適體-蛋白質(zhì)分子的特異性識別,導致適體與其互補鏈形成的DNA雙鏈解旋,“孔帽”移走,實現(xiàn)了對蛋白質(zhì)分子凝血酶生物響應(yīng)的可控制釋放客體分子,以此系統(tǒng)為基礎(chǔ)建立了電致化學發(fā)光免標記性檢測凝血酶的新方法。此方法測定凝血酶的線性范圍為5.0×10-16mol/L-8.0×10-14 mol/L,檢測限為4.0×10-16 mol/L。該方法具有較高的靈敏度,良好的特異性識別能力,檢測過程中基本不受其他蛋白質(zhì)的干擾。
　　 2.基于

4、適體分子為“孔帽”的磁性納米粒子/介孔二氧化硅可控制釋放系統(tǒng)的研究采用化學共沉淀法制備了Fe3O4磁性納米粒子,并以磁性Fe3O4納米粒子為核,介孔硅為殼制備了表面官能團化的磁性納米介孔二氧化硅球。利用適體DNA的磷酸基團與磁性介孔硅表面的氨基之間的靜電作用,將適體DNA靜電吸附在介孔表面以形成“孔帽”,加入蛋白質(zhì)分子凝血酶后,由于適體-蛋白質(zhì)分子的特異性識別,導致適體分子的構(gòu)型發(fā)生轉(zhuǎn)變,由任意伸展的狀態(tài)轉(zhuǎn)變?yōu)樗拿骟w構(gòu)型,從介孔表面脫離

5、,使孔道內(nèi)的客體分子釋放出來,構(gòu)建了以蛋白質(zhì)分子凝血酶生物刺激響應(yīng)的磁性介孔硅可控制釋放系統(tǒng)。以此系統(tǒng)為基礎(chǔ),建立了一種簡單易操作的電致化學發(fā)光免標記檢測凝血酶的新方法。此方法檢測凝血酶的線性范圍為6.0×10-13mol/L-8.0×10-9mol/L,對2×10-12mol/L,平行測定7次的相對標準偏差為4.9％。結(jié)果表明此方法具有很好的檢測靈敏度,特異性,和選擇性。
　　 3.吲哚-3-羧酸電致化學發(fā)光性質(zhì)的初步研究本文