表面等離子體子共振生物傳感技術(shù)檢測生物分子的研究.pdf

1、表面等離子體子共振(Surface Plasmon Resonance，SPR)技術(shù)對于生物分子相互作用分析來說是最有效的方法之一，尤其是它的表面敏感應答、無需標記檢測和實時監(jiān)測反應動態(tài)的優(yōu)點，為生物分子之間相互作用的專一性、親和性、動力學關(guān)系和分析復雜樣品中目標分子等提供了豐富的信息。本文通過文獻綜述和實驗研究兩個方面闡述了SPR傳感器的原理和應用，并建立了三種SPR傳感器檢測不同類型生物分子的靈敏分析方法。
　　 本論文文獻

2、綜述部分詳細闡述了SPR的原理及研究背景和意義，并且對SPR的原理、傳感器類型、應用及最新進展進行了綜述。
　　 本論文實驗研究部分共包括三個主要內(nèi)容:1、在SPR傳感器上建立小分子物質(zhì)—青霉素的檢測方法。利用波長檢測型SPR生物傳感器檢測青霉素，其主要原理依據(jù)是:青霉素屬于β-內(nèi)酰胺環(huán)類抗生素，在強酸環(huán)境下分解產(chǎn)生青霉胺，然后引入膠體金與青霉胺結(jié)合，既可以增加青霉胺的質(zhì)量也可增強SPR生物傳感器的共振信號，實現(xiàn)靈敏檢測。由于S

3、PR傳感器檢測小分子物質(zhì)具有一定的挑戰(zhàn)性，而本方法對于部分小分子物質(zhì)具有有效的檢測能力;2、利用SPR傳感器研究凋亡酶caspase-3的堿基差異變化，使用波長檢測型SPR生物傳感器應用到凋亡酶caspase-3DNA寡核苷酸片段的堿基錯配研究。為了增強檢測靈敏度，Taq DNA聚合酶被用來作為信號放大的工具。Taq DNA聚合酶在聚合酶鏈式反應中用來與DNA模板—引物復合物結(jié)合，最后實現(xiàn)鏈的延伸，而在SPR生物傳感器檢測過程中，可用它

4、來鑒別寡核苷酸鏈的差異。本研究不僅優(yōu)化酶的反應條件提高了檢測的靈敏度，同時也是對固相表面的酶反應條件做相應的摸索;3、在SPR傳感器上檢測肝癌細胞HepG2。采用SPR成像裝置與微流控芯片相結(jié)合，建立了有效地捕獲肝癌細胞HepG2并檢測其濃度的方法。檢測過程中，利用癌胚抗原抗體來捕獲HepG2，為了使癌胚抗原抗體的抗原結(jié)合位點充分暴露出來，引入蛋白A(Protein A)來連接抗體重鏈。有效地捕獲癌細胞并檢測其濃度或者數(shù)目，對于抗癌藥物