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1、隨著羅非魚(yú)集約化池塘養(yǎng)殖的快速發(fā)展,高密度放養(yǎng)、過(guò)量投料及藥物殘留等問(wèn)題日益突出,這不僅對(duì)水資源造成了污染和浪費(fèi),而且也增加了各類(lèi)病害的發(fā)生機(jī)率,更阻礙了我國(guó)池塘養(yǎng)殖可持續(xù)發(fā)展。本課題通過(guò)構(gòu)建魚(yú)腥草與羅非魚(yú)共生池塘養(yǎng)殖系統(tǒng),研究了魚(yú)腥草浮床對(duì)羅非魚(yú)養(yǎng)殖池塘的水質(zhì)和魚(yú)體非特異免疫力的影響,同時(shí)對(duì)該共生養(yǎng)殖系統(tǒng)的水體、底泥以及魚(yú)體腸道菌群的結(jié)構(gòu)和代謝功能多樣性做了調(diào)查,獲得的主要研究結(jié)果如下:
1.研究了2014年9月~11月魚(yú)腥
2、草浮床對(duì)養(yǎng)殖水質(zhì)的調(diào)控作用和對(duì)吉富羅非魚(yú)非特異免疫力影響。結(jié)果顯示,在持續(xù)3個(gè)月的養(yǎng)殖實(shí)驗(yàn)過(guò)程中,實(shí)驗(yàn)塘COD、NH4+-N、NO2--N、TP和PO43--P等主要水質(zhì)指標(biāo)均顯著低于對(duì)照塘(P<0.05);pH、DO則呈不規(guī)律波動(dòng),實(shí)驗(yàn)塘與對(duì)照塘無(wú)顯著差異。實(shí)驗(yàn)塘羅非魚(yú)血清溶菌酶(LSZ)、一氧化氮(NO)、堿性磷酸酶(AKP)以及超氧化物歧化酶(SOD)的酶活力均高于對(duì)照塘羅非魚(yú)(P<0.05),丙二醛(MDA)活力則低于對(duì)照塘(P
3、<0.05)。此外,實(shí)驗(yàn)塘和對(duì)照塘羅非魚(yú)平均成活率分別為95.25%和88.15%;實(shí)驗(yàn)塘羅非魚(yú)的相對(duì)增重率和特定增長(zhǎng)率分別達(dá)到326.63%和161.19%,遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于對(duì)照塘的264.4%和143.68%。
2.為探究魚(yú)腥草浮床對(duì)羅非魚(yú)池塘養(yǎng)殖系統(tǒng)中細(xì)菌群落的影響,本研究采用Biolog-Eco和PCR-DGGE技術(shù),對(duì)比分析了9~11月魚(yú)腥草浮床(實(shí)驗(yàn)塘)和常規(guī)養(yǎng)殖(對(duì)照塘)兩種模式下,養(yǎng)殖系統(tǒng)中水體、魚(yú)體腸道和底泥菌群的結(jié)
4、構(gòu)和功能多樣性特征。結(jié)果表明:
①9月份實(shí)驗(yàn)塘水體菌群整體代謝強(qiáng)度低于對(duì)照塘,10~11月份實(shí)驗(yàn)塘菌群代謝強(qiáng)度高于對(duì)照塘,且養(yǎng)殖期間實(shí)驗(yàn)塘豐富度、Shannon-Wiener和Pielou指數(shù)均高于對(duì)照塘;主成分分析水體菌群對(duì)31種碳源代謝性能的影響,發(fā)現(xiàn)水體菌群對(duì)碳源的利用存在種類(lèi)差異性。9月份實(shí)驗(yàn)塘和對(duì)照塘菌群利用碳源的種類(lèi)相差很大,而10~11月份差異不大,但對(duì)不同碳源的利用程度各不相同。不同月份實(shí)驗(yàn)塘和對(duì)照塘水體菌群利
5、用碳源的差異程度為9月>11月>10月;此外,采用典型對(duì)應(yīng)分析水體菌群碳源代謝與環(huán)境因子的相互關(guān)系,發(fā)現(xiàn)氨氮、總磷、溫度和硝酸鹽是影響池塘水體菌群代謝功能的主要因素;DGGE結(jié)果顯示:水體菌群主要有7個(gè)菌門(mén)組成,包括放線(xiàn)菌門(mén)(37.04%)、變形菌門(mén)(33.33%)、擬桿菌門(mén)、厚壁菌門(mén)、綠彎菌門(mén)、藍(lán)細(xì)菌門(mén)和纖維桿菌門(mén),10和11月份實(shí)驗(yàn)塘的綠彎菌門(mén)(條帶19)亮度均強(qiáng)于對(duì)照塘,而9月份差異不大;羅非魚(yú)腸道菌群分屬3個(gè)門(mén),分別是厚壁菌門(mén)(
6、37.50%)、變形菌門(mén)(37.50%)和梭桿菌門(mén)(25.00%),其中變形菌門(mén)主要包括δ和γ兩種亞門(mén)。其中實(shí)驗(yàn)塘B11與實(shí)驗(yàn)塘B10相似度可達(dá)86.0%,與對(duì)照塘A10和對(duì)照塘A11相似度均在40.0%左右,而9月份對(duì)照塘比實(shí)驗(yàn)塘的相似度高。
②9月份實(shí)驗(yàn)塘底泥微生物代謝強(qiáng)度和菌群多樣性指數(shù)均低于對(duì)照塘;但10~11月份則明顯高于對(duì)照塘,且不同月份豐富度指數(shù)與對(duì)照塘相比均差異顯著(P<0.05)。主成分分析發(fā)現(xiàn):不同月份實(shí)驗(yàn)
7、塘和對(duì)照塘底泥菌群利用碳源種類(lèi)的差異程度為10月>11月>9月。同時(shí),實(shí)驗(yàn)塘和對(duì)照塘不同月份底泥中菌群對(duì)羧酸類(lèi)碳源的相對(duì)利用率差異較大。DGGE結(jié)果顯示:實(shí)驗(yàn)塘和對(duì)照塘底泥主要的菌群結(jié)構(gòu)組成相似,分屬于6個(gè)門(mén),包括變形菌門(mén)、擬桿菌門(mén)、酸桿菌門(mén)、綠彎菌門(mén)(Chloroflexi)、藍(lán)細(xì)菌門(mén)和梭桿菌門(mén),其中變形菌門(mén)(54.17%)均為優(yōu)勢(shì)菌群,但同一月份實(shí)驗(yàn)塘菌群多樣性(條帶數(shù))均明顯多于對(duì)照塘。而且,9和10月份實(shí)驗(yàn)塘的藍(lán)細(xì)菌門(mén)(條帶3)
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