分子水平上調控細胞粘附和分離體系的構建.pdf

1、生物材料科學是介于材料科學與生命科學之間并相互滲透而產(chǎn)生的一個重要邊緣學科。生物材料發(fā)展與進步的根本源動力是健康的需要。人們對生物材料與生命體相互作用的現(xiàn)象和規(guī)律進行了深入研究。目前,生物材料的發(fā)展前沿在于生物相容性材料,納米生物材料,生物礦化材料和仿生智能材料等。本課題采用基底上固定能形成二聚體的一對α-螺旋多肽A和B及溫敏性高分子構建了一類能在分子水平上精確控制細胞粘附和分離的體系,主要工作有以下內(nèi)容。
　　運用分子生物學手段

2、設計和構建了多肽Bcys、NcysA、和NcysARGD相應的目的基因及多肽的表達及純化。由于是基因工程表達產(chǎn)物,這些多肽具有極佳的生物相容性和結構可控性,通過在多肽末端引入半胱氨酸與其它溫敏材料連接,賦予分子多重特性?；蚬こ潭嚯腁與B中α-螺旋能通過疏水相互作用形成亮氨酸拉鏈的二聚體結構,顯示了其在形成復雜體系中的應用潛能。
　　采用可逆加成-斷裂鏈轉移(RAFT)聚合反應合成了一系列的溫敏高分子(mPEG-PNIPAM),通

3、過偶聯(lián)劑將溫敏高分子上的活性基團和多肽Bcys上的半胱氨酸上的巰基形成多肽和高分子的偶聯(lián)物mPEG-PNIPAM-B。實驗結果表明,PNIPAM的溫敏效應不因修飾上mPEG和多肽B而消失。
　　最后,通過多肽A和B能形成一對穩(wěn)定的二聚體結構,在多肽A上引入生物活性配體(RGD作為模型配體),通過多肽B上連接的溫敏性高分子和PEG來遮蔽固定在基底上的生物活性配體,通過溫敏的高分子開關來調節(jié)多肽A上的活性配體和細胞相互接觸和分離,從而