AMP適配子生物傳感器的構(gòu)建及其應(yīng)用.pdf

1、微生物的生長(zhǎng)通常指群體的擴(kuò)增，對(duì)微生物生長(zhǎng)狀況的監(jiān)測(cè)，無論在理論研究還是在生產(chǎn)實(shí)踐中都具有重要的意義。傳統(tǒng)的研究主要是通過微生物生長(zhǎng)量測(cè)定法，微生物計(jì)數(shù)法，生理指標(biāo)法等來判斷微生物的生長(zhǎng)情況，對(duì)于微生物細(xì)胞內(nèi)產(chǎn)生劇烈的能量變化過程的檢測(cè)一直處于一種空白。AMP是能量代謝過程中一種重要的代謝產(chǎn)物，細(xì)胞內(nèi)AMP含量的多少直接決定了細(xì)胞中能量代謝情況，此外AMP的特殊環(huán)狀結(jié)構(gòu)：cAMP亦是細(xì)胞信號(hào)傳導(dǎo)過程中非常重要的物質(zhì)。因此，細(xì)胞內(nèi)AMP的

2、水平是衡量微生物生長(zhǎng)好壞狀況的一個(gè)很重要的內(nèi)部指標(biāo)。本文設(shè)計(jì)并構(gòu)建生物功能化了一種具有特異性親和能力的AMP適配子生物傳感器，與具有優(yōu)越分離能力的生物功能化磁珠結(jié)合，用于細(xì)菌體內(nèi)AMP的快速檢測(cè)。整個(gè)實(shí)驗(yàn)體系包括以下幾個(gè)方面工作：
　　 1.具有超順磁性的鏈霉親和素磁珠的化學(xué)合成。通過x-衍射實(shí)驗(yàn)檢測(cè)表明：該非水相法合成的磁珠粒徑約19 nm，成分為γ-Fe2O3構(gòu)成的超順磁性晶體。在堿性環(huán)境下，磁粒子與TEOS的水解反應(yīng)，形成

3、了粒徑均勻的γ-Fe2O3/SiO2復(fù)合粒子。通過AEAPS的進(jìn)一步的修飾，可以連接鏈霉親和素，形成順磁性的鏈霉親和素磁珠。
　　 2.AMP適配子生物傳感器的構(gòu)建。該生物傳感器主要由2條不同的寡聚DNA鏈組成。當(dāng)這兩條鏈在室溫下雜交形成復(fù)合體，并按一定比例與鏈霉親和素磁珠混合后，雜交鏈-磁珠復(fù)合物形成并構(gòu)建了一個(gè)完整的AMP適配子生物傳感器。
　　 3.AMP適配子生物傳感器用于微生物細(xì)胞內(nèi)AMP的快速檢測(cè)?；谶m配子