AMP適配子生物傳感器的構(gòu)建及其應(yīng)用.pdf

1、微生物的生長通常指群體的擴增，對微生物生長狀況的監(jiān)測，無論在理論研究還是在生產(chǎn)實踐中都具有重要的意義。傳統(tǒng)的研究主要是通過微生物生長量測定法，微生物計數(shù)法，生理指標法等來判斷微生物的生長情況，對于微生物細胞內(nèi)產(chǎn)生劇烈的能量變化過程的檢測一直處于一種空白。AMP是能量代謝過程中一種重要的代謝產(chǎn)物，細胞內(nèi)AMP含量的多少直接決定了細胞中能量代謝情況，此外AMP的特殊環(huán)狀結(jié)構(gòu)：cAMP亦是細胞信號傳導過程中非常重要的物質(zhì)。因此，細胞內(nèi)AMP的

2、水平是衡量微生物生長好壞狀況的一個很重要的內(nèi)部指標。本文設(shè)計并構(gòu)建生物功能化了一種具有特異性親和能力的AMP適配子生物傳感器，與具有優(yōu)越分離能力的生物功能化磁珠結(jié)合，用于細菌體內(nèi)AMP的快速檢測。整個實驗體系包括以下幾個方面工作：
　　 1.具有超順磁性的鏈霉親和素磁珠的化學合成。通過x-衍射實驗檢測表明：該非水相法合成的磁珠粒徑約19 nm，成分為γ-Fe2O3構(gòu)成的超順磁性晶體。在堿性環(huán)境下，磁粒子與TEOS的水解反應(yīng)，形成

3、了粒徑均勻的γ-Fe2O3/SiO2復合粒子。通過AEAPS的進一步的修飾，可以連接鏈霉親和素，形成順磁性的鏈霉親和素磁珠。
　　 2.AMP適配子生物傳感器的構(gòu)建。該生物傳感器主要由2條不同的寡聚DNA鏈組成。當這兩條鏈在室溫下雜交形成復合體，并按一定比例與鏈霉親和素磁珠混合后，雜交鏈-磁珠復合物形成并構(gòu)建了一個完整的AMP適配子生物傳感器。
　　 3.AMP適配子生物傳感器用于微生物細胞內(nèi)AMP的快速檢測?；谶m配子