基于量子點(diǎn)標(biāo)記的適配子生物傳感器的研究.pdf

1、本研究基于適配子與其目標(biāo)物特異性結(jié)合后發(fā)生構(gòu)象改變原理，利用量子點(diǎn)作為熒光共振能量轉(zhuǎn)移體系的供體，Cy5有機(jī)熒光基團(tuán)作為熒光共振能量轉(zhuǎn)移體系的受體，設(shè)計了檢測適配子目標(biāo)物的適配子生物傳感器，具體開展了以下幾個方面的工作： 1．基于ATP適配子與其目標(biāo)物特異性結(jié)合后發(fā)生構(gòu)象改變原理，利用605 nm量子點(diǎn)/Cy5作為熒光共振能量轉(zhuǎn)移體系的供體/受體對，設(shè)計了檢測ATP的適配子生物傳感器，實(shí)現(xiàn)了快速、方便、特異性檢測ATP。

2、 當(dāng)體系中不存在ATP時，3'端修飾Cy5的寡聚核苷酸鏈、3'端修飾生物素的寡聚核苷酸鏈與捕捉DNA鏈發(fā)生雜交反應(yīng)形成雜交復(fù)合體，通過鏈霉親和素與生物素之間特異性反應(yīng)，雜交復(fù)合體與鏈霉親和素修飾的605 nm量子點(diǎn)結(jié)合。在這種條件下，在488 nm激發(fā)光下激發(fā)量子點(diǎn)，借助熒光共振能量轉(zhuǎn)移，Cy5有機(jī)熒光基團(tuán)在670 nm處可以檢測到熒光。當(dāng)反應(yīng)體系中存在ATP時，ATP與適配子結(jié)合，導(dǎo)致3'端修飾Cy5的寡聚核苷酸鏈從雜交復(fù)合體上分離，

3、使605 nm量子點(diǎn)與Cy5之間的距離變大，兩者的熒光強(qiáng)度發(fā)生改變。因此，可以通過檢測熒光強(qiáng)度的變化來檢測不同濃度的ATP。 2．基于凝血酶適配子與鉀離子特異性結(jié)合后構(gòu)象發(fā)生改變的原理，利用605 nm量子點(diǎn)/Cy5作為熒光共振能量轉(zhuǎn)移體系的供體/受體對，設(shè)計了檢測鉀離子的適配子生物傳感器。當(dāng)體系中不存在鉀離子時，標(biāo)記有Cy5有機(jī)熒光基團(tuán)的適配子與605 nm量子點(diǎn)結(jié)合，在488 nm激發(fā)光處激發(fā)605 nm量子點(diǎn)，借助熒光共振