活血化瘀方劑對急性高眼壓大鼠視網(wǎng)膜HIF-1α表達的影響.pdf

1、目的：探討中藥活血化瘀方劑對大鼠視網(wǎng)膜急性高眼壓損傷的保護作用及對低氧誘導因子-1α(HIF-1α)表達水平的影響。方法140只清潔級健康成年Wistar大鼠隨機分為四個組：正常對照組10只、穿刺組10只、加壓組60只和治療組60只。穿刺組大鼠左眼行前房穿刺，加壓組和治療組大鼠左眼采用前房灌注加壓法制作急性高眼壓模型維持60min，加壓組大鼠分別于加壓后2h，12h，1d，3d，7d，14d每個時間點隨機取10只處死，治療組在加壓后即刻

2、給予活血化瘀方劑灌胃，4ml/d，并分別在給藥后2h，12h，1d，3d，7d，14d每個時間點隨機取10只處死。正常對照組、穿刺組及加壓組、治療組各時間點10只老鼠中隨即取5只采用HE染色在光鏡下觀察視網(wǎng)膜的形態(tài)學改變，免疫組織化學方法檢測HIF-1α蛋白表達量的變化；剩余5只采用實時定量逆轉錄聚合酶鏈反應(Real-TimeqRT-PCR)方法檢測HIF-1αmRNA的表達變化。
　　 結果：1．光鏡：加壓組2h，視網(wǎng)膜輕度

3、水腫；12h，水腫加重，厚度增加；1d，全層高度水腫，神經(jīng)節(jié)細胞(RGCs)排列疏松；3d，水腫減輕，神經(jīng)節(jié)細胞層(GCL)輕度變薄；7d，水腫基本消失，視網(wǎng)膜各層結構排列紊亂，殘留RGCs數(shù)目少；14d，視網(wǎng)膜萎縮變薄，RGCs數(shù)目稀少，細胞核形態(tài)不規(guī)則。加壓+用藥組變化趨勢與加壓組基本相同，2h、12h小組視網(wǎng)膜變化與加壓組同一時間點無明顯差別，其他各時間點視網(wǎng)膜損傷程度均較加壓組同一時間點輕。
　　 2．免疫組織化學染色：

4、加壓組2hGCL出現(xiàn)HIF-1α弱陽性表達，12h表達到高峰，然后逐漸降低。加壓+用藥組HIF-1α變化趨勢同加壓組，除2h、12h小組外，其他各時間點的表達量均比加壓組同一時間點低。
　　 3．Real-TimeqRT-PCR:加壓組2hHIF-1αmRNA表達量即高于正常對照組，12h達到高峰，然后逐漸下降；加壓+用藥組變化趨勢同加壓組，除2h、12h小組外，其他各時間點的表達量均比加壓組同一時間點低。結論1、大鼠視網(wǎng)膜的H