藏茵陳的利膽退黃藥效物質(zhì)鑒定及其藥物代謝和藥理作用研究.pdf

1、藏茵陳在臨床上廣泛用于急性黃疸性肝炎、病毒性肝炎和膽囊炎等疾病的治療，它的主要化學(xué)成分包括三萜、呫噸酮和環(huán)烯醚萜類等。為了深入探究藏茵陳的藥效物質(zhì)基礎(chǔ)及其作用機(jī)制，本論文開展了以下六個(gè)方面的研究。
　　第一，以異硫氰酸奈酯（ANIT）致大鼠急性黃疸型肝炎為藥理模型，進(jìn)行了藏茵陳不同部位的藥效篩選，確定了藏茵陳利膽退黃的有效部位為藏茵陳總萜酮，并通過正交優(yōu)化獲得了它的醇提水沉聯(lián)合樹脂純化的制備工藝路線及參數(shù)。
　　第二，藏茵陳

2、總萜酮的物質(zhì)基礎(chǔ)研究。采用硅膠柱層析、葡聚糖凝膠層析、反相硅膠柱層析等方法對藏茵陳總萜酮進(jìn)行了化學(xué)成分的分離純化，通過NMR、MS等光譜技術(shù)確證了13個(gè)化合物的結(jié)構(gòu)，其中包括獐牙菜苦苷、獐芽菜苷、龍膽苦苷等4個(gè)環(huán)烯醚萜類成分，芒果苷、當(dāng)藥醇苷、1-羥基-3,5-二甲氧基呫噸酮、1,8-二羥基-3,5-二甲氧基呫噸酮等7個(gè)呫噸酮類成分，葒草苷和異葒草苷2個(gè)黃酮類成分。還采用HPLC/MS/MS方法對藏茵陳總萜酮進(jìn)行了定性分析。
　　

3、第三，系統(tǒng)考察了藏茵陳總萜酮及其代表性成分獐芽菜苦苷和當(dāng)藥醇苷對急性黃疸型肝炎大鼠膽汁分泌和血清指標(biāo)的影響，結(jié)果表明它們均能顯著促進(jìn)大鼠膽汁的分泌和顯著降低血清轉(zhuǎn)氨酶及膽紅素指標(biāo)，并顯著優(yōu)于陽性對照藥茵梔黃顆粒(P＜0.01)。組織病理學(xué)結(jié)果表明藏茵陳總萜酮能顯著改善ANIT致大鼠肝臟及膽管的病理損傷。
　　第四，采用腸內(nèi)菌代謝模型對藏茵陳總萜酮進(jìn)行了體外代謝研究，結(jié)果表明它經(jīng)腸內(nèi)菌發(fā)生部分代謝，代謝產(chǎn)物包括龍膽寧堿、芒果苷元、1

4、,5,8-三羥基-3-甲氧基呫噸酮（當(dāng)藥醇苷苷元）等。采用Caco-2細(xì)胞研究了藏茵陳總萜酮代表性成分的吸收行為，結(jié)果表明當(dāng)藥醇苷和1,5,8-三羥基-3-甲氧基呫噸酮為中等強(qiáng)度吸收成分，獐芽菜苦苷和龍膽寧堿為較難吸收成分。采用肝微粒體模型進(jìn)行了代謝研究，結(jié)果表明當(dāng)藥醇苷可經(jīng)肝微粒體代謝成1,5,8-三羥基-3-甲氧基呫噸酮及其二相代謝產(chǎn)物。
　　第五，開展了藏茵陳總萜酮的體內(nèi)代謝研究，結(jié)果表明大鼠灌胃藏茵陳總萜酮24小時(shí)后，尿液

5、中除含有獐牙菜苦苷、芒果苷等原型成分外，還含有龍膽寧堿、芒果苷元、1,5,8-三羥基-3-甲氧基呫噸酮及其他二相代謝產(chǎn)物等代謝成分，這與以上藏茵陳總萜酮體外代謝結(jié)果相吻合。
　　第六，考察了藏茵陳總萜酮代表性成分獐芽菜苦苷及其代謝產(chǎn)物龍膽寧堿的致突變及抗突變作用，結(jié)果表明它們均未引起Ames實(shí)驗(yàn)菌株回復(fù)突變數(shù)和小鼠骨髓微核率的增加，表明它們無致突變性，且均能拮抗由CP及MC引起的突變作用，表明它們具有一定的抗突變性。此外，考察了當(dāng)