早期益生菌干預(yù)對(duì)嬰兒腸道微生態(tài)學(xué)變化、生長(zhǎng)發(fā)育和遠(yuǎn)期健康影響的研究.pdf

1、目的:母乳喂養(yǎng)是嬰兒期公認(rèn)的最佳喂養(yǎng)方式，也是嬰兒腸道菌群的重要來(lái)源。嬰兒期是腸道菌群定植的關(guān)鍵時(shí)期，腸道菌群早期定植模式可影響腸道生理發(fā)育和免疫系統(tǒng)成熟，影響遠(yuǎn)期肥胖、過敏性疾病等的發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)。本研究通過分析不同喂養(yǎng)方式嬰兒腸道菌群變化與超重、肥胖發(fā)生率及神經(jīng)心理發(fā)育情況關(guān)系的研究，力圖從腸道微生態(tài)學(xué)角度闡明早期益生菌干預(yù)通過修飾腸道菌群，觀察其對(duì)遠(yuǎn)期超重、肥胖發(fā)生率及神經(jīng)心理發(fā)育的影響，為益生菌作為膳食策略的一部分，用于提高菌群轉(zhuǎn)化營(yíng)

2、養(yǎng)物質(zhì)為活性化合物的能力，從而促進(jìn)遠(yuǎn)期健康提供依據(jù)。
　　方法:選擇2012年01月-2013年11月在河北醫(yī)科大學(xué)第三醫(yī)院和石家莊市第四人民醫(yī)院出生且符合入選標(biāo)準(zhǔn)的足月新生兒134例，生后能堅(jiān)持純母乳喂養(yǎng)4-6個(gè)月以上的新生兒44例為A組（母乳喂養(yǎng)組）。生后1周內(nèi)因各種原因不能堅(jiān)持純母乳喂養(yǎng)而改為母乳替代品喂養(yǎng)，且符合上述入選標(biāo)準(zhǔn)的新生兒90例，按照隨機(jī)雙盲原則由課題設(shè)計(jì)人員對(duì)人工喂養(yǎng)嬰兒隨機(jī)分組，按隨機(jī)數(shù)字法選定前47個(gè)隨機(jī)數(shù)

3、對(duì)應(yīng)的編號(hào)為B組（益生菌干預(yù)組），第48個(gè)隨機(jī)數(shù)及之后對(duì)應(yīng)的編號(hào)為C組（對(duì)照組）。A組嬰兒44例，男23例、女21例，其中4例在隨訪過程中因依從性差等原因退組，故實(shí)際例數(shù)為40例，男21例，女19例;B組嬰兒47例，采用益生菌配方奶粉喂養(yǎng)，男22例、女25例，其中6例在隨訪過程中因依從性差等原因退組，故實(shí)際例數(shù)為41例，男20例，女21例;C組嬰兒43例，采用普通配方奶粉喂養(yǎng)，男20例、女23例，其中5例在隨訪過程中因失訪而脫落，故實(shí)際

4、例數(shù)38例，男18例，女20例。入選嬰兒均為經(jīng)陰道分娩出生，生后第5個(gè)月時(shí)添加輔食，所有嬰兒及其雙親均生活在石家莊市或其周邊縣市，氣候、居住環(huán)境和飲食條件等相當(dāng)。所有入選對(duì)象均在研究開始前簽訂知情同意書，并獲河北醫(yī)科大學(xué)第三醫(yī)院倫理道德委員會(huì)同意。本研究分為兩部分，臨床指標(biāo)觀察和腸道菌群定量分析。對(duì)所有入組嬰兒，其母親均記錄每日嬰兒喂哺次數(shù)、每次攝入量、輔食添加情況，以及大便頻率、嘔吐次數(shù)及煩躁哭鬧情況等，專家就以上情況進(jìn)行信息采集。由

5、經(jīng)過專業(yè)培訓(xùn)的醫(yī)護(hù)人員，在嬰兒出生當(dāng)時(shí)、生后第1個(gè)月、3個(gè)月、6個(gè)月和12個(gè)月時(shí)到河北醫(yī)科大學(xué)第三醫(yī)院兒科診室測(cè)量身長(zhǎng)、體重、頭圍、胸圍、皮下脂肪和上臂圍等生長(zhǎng)發(fā)育指標(biāo)，并計(jì)算出BMI。按照首都兒科研究所編制的《0～6歲小兒神經(jīng)心理發(fā)育檢查表》，由專業(yè)醫(yī)護(hù)人員從大運(yùn)動(dòng)、精細(xì)運(yùn)動(dòng)、適應(yīng)能力、語(yǔ)言和社交行為5個(gè)能區(qū)對(duì)12月齡嬰兒進(jìn)行發(fā)育商評(píng)估。采用WHO2006年生長(zhǎng)標(biāo)準(zhǔn)的BMI值為參考標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行超重和肥胖的判定。采用熒光定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(

6、Flurogenic Quantitative Polym-erase ChainReaction，F(xiàn)Q-PCR)技術(shù)，對(duì)嬰兒出生后第3天、7天、1個(gè)月、3個(gè)月、6個(gè)月和第12個(gè)月時(shí)糞便標(biāo)本中雙歧桿菌(bifidobacteria)、乳酸桿菌(Lactobacillus)、腸球菌(Enterococcus)和大腸桿菌(Escherichia coli)進(jìn)行定量測(cè)定，了解不同喂養(yǎng)方式嬰兒的腸道菌群變化對(duì)嬰兒體格生長(zhǎng)發(fā)育、神經(jīng)心理發(fā)育和遠(yuǎn)期

7、超重、肥胖的影響。統(tǒng)計(jì)分析采用SPSS13.0軟件，計(jì)量資料均進(jìn)行正態(tài)性檢驗(yàn)及方差齊性檢驗(yàn)，多樣本均數(shù)比較采取方差分析。計(jì)數(shù)資料采用卡方檢驗(yàn)。以α=0.05作為檢驗(yàn)水準(zhǔn)。
　　結(jié)果:
　　1不同喂養(yǎng)方式嬰兒出生后腸道菌群動(dòng)態(tài)變化:出生早期糞便中主要出現(xiàn)腸球菌和大腸桿菌等需氧菌，定植數(shù)量較多。雙歧桿菌、乳酸桿菌等厭氧菌約在生后第3天初始定植，后呈增長(zhǎng)趨勢(shì)，第12個(gè)月時(shí)維持在相對(duì)穩(wěn)定狀態(tài)。三組嬰兒糞便中乳酸桿菌自定植后數(shù)量呈增加

8、趨勢(shì)，第6個(gè)月時(shí)數(shù)量有所下降，與第3個(gè)月和第12個(gè)月時(shí)乳酸桿菌數(shù)量比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05)，其他時(shí)間點(diǎn)乳酸桿菌數(shù)量比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P均＜0.05）。生后第3天、7天、1個(gè)月和6個(gè)月時(shí)，A、B組乳酸桿菌數(shù)量均高于C組，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P均＜0.05），A、B組間比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05);在第3個(gè)月和第12個(gè)月時(shí)，A、B、C組嬰兒糞便乳酸桿菌數(shù)量無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均＞0.05)。三組嬰兒糞便中雙歧桿菌自定植后數(shù)量呈增加趨勢(shì)，A

9、、B組嬰兒雙歧桿菌數(shù)量在生后第3天、7天、1個(gè)月、3個(gè)月、6個(gè)月和12個(gè)月時(shí)均高于C組，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P均＜0.05），A、B組間比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＞0.05）。三組嬰兒糞便B/E值隨時(shí)間推移呈波動(dòng)性變化，A、B組嬰兒糞便B/E值在生后第3天、7天、1個(gè)月、3個(gè)月和12個(gè)月時(shí)均高于C組(P均＜0.05)，在生后第6個(gè)月時(shí)，A、B組嬰兒糞便B/E值與C組比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。A、B組間比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05)。

10、>　　2不同喂養(yǎng)方式嬰兒出生后體格生長(zhǎng)發(fā)育和神經(jīng)心理發(fā)育(DQ值)的動(dòng)態(tài)觀察:三組嬰兒身長(zhǎng)隨時(shí)間推移呈增長(zhǎng)趨勢(shì)，各測(cè)量時(shí)間點(diǎn)間比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P均＜0.05）。生后第6個(gè)月和第12個(gè)月時(shí)，A、B組嬰兒身長(zhǎng)均高于C組（P均＜0.05），A、B組間比較無(wú)差異（P＞0.05）。三組嬰兒體重隨時(shí)間推移呈增加趨勢(shì)，各測(cè)量時(shí)間點(diǎn)之間比較均有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P均＜0.05)。生后第12個(gè)月時(shí)，A、B組體重均低于C組，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均＜0.05)，A、

11、B組間比較無(wú)差異(P＞0.05)。三組嬰兒生后第3個(gè)月、第6個(gè)月和第12個(gè)月時(shí)BMI比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P均＜0.05）。生后第6個(gè)月、12個(gè)月時(shí)，A、B組BMI均低于C組（P均＜0.05），A、B組間比較無(wú)差異(P＞0.05)。三組嬰兒在生后第12個(gè)月時(shí)A、B組DQ總值均高于C組（P均＜0.05），A、B組比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＞0.05）。
　　3不同喂養(yǎng)方式嬰兒出生后超重和肥胖發(fā)生情況:生后第6個(gè)月時(shí)，A、B、C組嬰兒超重發(fā)生率

12、分別為12.5％，17.1％，28.9％，組間比較無(wú)差異(P＞0.05);生后第12個(gè)月時(shí)，A、B、C組嬰兒超重發(fā)生率分別為17.5％，22.0％，42.1％，A、B組均低于C組（P均＜0.05），A、B組比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05)。生后第6個(gè)月時(shí)，A、B、C組嬰兒肥胖發(fā)生率分別為7.5％，9.8％，21.1％，組間比較無(wú)差異（P＞0.05）;生后第12個(gè)月時(shí)，A、B、C組嬰兒肥胖發(fā)生率分別為10.0％，12.2％，34.2％，A

13、、B組均低于C組（P均＜0.05），A、B組比較無(wú)差異(P＞0.05)。
　　4超重和肥胖嬰兒腸道雙歧桿菌、B/E值變化:超重嬰兒糞便中雙歧桿菌數(shù)量在生后第6個(gè)月、第12個(gè)月時(shí)均低于正常體重嬰兒（P均＜0.05）。肥胖嬰兒在生后第6個(gè)月、第12個(gè)月時(shí)糞便中雙歧桿菌數(shù)量均低于正常體重者（P均＜0.05）。超重嬰兒和正常體重嬰兒糞便B/E值均高于肥胖嬰兒（P均＜0.05）;超重嬰兒和正常體重嬰兒糞便B/E值比較無(wú)差異(P＞0.05)。

14、肥胖嬰兒B/E值均低于正常體重嬰兒（P均＜0.05）。
　　5 B/E值與BMI相關(guān)分析:嬰兒糞便B/E值在生后第6個(gè)月、第12個(gè)月時(shí)與BMI存在直線負(fù)相關(guān)關(guān)系（P＜0.05）。
　　結(jié)論:
　　1新生兒生后腸道菌群的定植是一個(gè)復(fù)雜過程，由于出生時(shí)腸內(nèi)充斥大量氧氣，表現(xiàn)在嬰兒糞便中腸球菌和大腸桿菌為代表需氧菌的優(yōu)先定植，消耗氧氣，改變了腸道微生態(tài)生境，出現(xiàn)了以雙歧桿菌、乳酸桿菌為代表的厭氧菌的后期定植，這種以厭氧菌占優(yōu)

15、勢(shì)的生態(tài)學(xué)格局在生后第12個(gè)月時(shí)趨于穩(wěn)定。
　　2喂養(yǎng)方式不同是影響腸道菌群定植和變遷的主要因素之一，母乳喂養(yǎng)兒腸道中雙歧桿菌、乳酸桿菌定植早，且達(dá)優(yōu)勢(shì)化時(shí)間早于人工喂養(yǎng)兒，穩(wěn)定于以雙歧桿菌為優(yōu)勢(shì)的菌群結(jié)構(gòu)。早期益生菌添加使嬰兒腸道菌群結(jié)構(gòu)接近母乳喂養(yǎng)兒，也形成了以雙歧桿菌為優(yōu)勢(shì)菌的生態(tài)學(xué)格局。
　　3母乳喂養(yǎng)兒的體格生長(zhǎng)發(fā)育和神經(jīng)心理發(fā)育指標(biāo)均優(yōu)于人工喂養(yǎng)兒。生后早期益生菌干預(yù)嬰兒，其體格生長(zhǎng)發(fā)育和神經(jīng)心理發(fā)育指標(biāo)接近母乳

16、喂養(yǎng)兒，表明及早建立和維持穩(wěn)定的腸道微生態(tài)學(xué)平衡可促進(jìn)嬰兒遠(yuǎn)期的身心健康。
　　4遠(yuǎn)期隨訪研究發(fā)現(xiàn)，普通奶粉喂養(yǎng)兒超重和肥胖發(fā)生率均高于母乳喂養(yǎng)兒和添加益生菌奶粉喂養(yǎng)兒，臨床表明嬰兒腸道菌群結(jié)構(gòu)的變化與遠(yuǎn)期超重和肥胖發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)存在關(guān)聯(lián)。
　　5超重和肥胖兒童糞便中雙歧桿菌數(shù)量低于正常體重兒，且肥胖兒童糞便雙歧桿菌/大腸桿菌比值低于正常體重兒，表明超重和肥胖兒童存在腸道菌群結(jié)構(gòu)的改變。
　　6益生菌早期干預(yù)可幫助嬰兒腸道及