重癥急性胰腺炎肺損傷和胰周感染發(fā)病機(jī)制的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、背景：重癥急性胰腺炎(severeacutepancreatitis，SAP)的病死率報道為25％，主要的發(fā)生有兩個高峰：第一個高峰發(fā)生早，即在最初7天內(nèi)，和多臟器功能障礙尤其呼吸功能障礙有關(guān)；第二個高峰發(fā)生晚，即在發(fā)病第二周，此時為多臟器功能衰竭合并敗血癥和胰周感染等。國內(nèi)有關(guān)研究SAP相關(guān)肺損傷的病理生理機(jī)制尚屬探索階段。本研究采用雨蛙素聯(lián)合脂多糖腹腔內(nèi)聯(lián)合給藥的方法建立SAP模型。從Ⅱ型肺泡細(xì)胞計數(shù)、肺臟超微結(jié)構(gòu)及活性氧代謝產(chǎn)物(

2、丙二醛)等方面研究APALI的病理生理機(jī)制；并通過胰腺炎小鼠腹腔灌洗液細(xì)菌培養(yǎng)和炎癥細(xì)胞凋亡和壞死情況的測定，明確腸道細(xì)菌易位和炎癥細(xì)胞的壞死、凋亡與胰腺炎病程發(fā)展的相關(guān)性。 目的：探討SAP早期肺損傷和胰周感染的病理生理機(jī)制，為探討治療肺損傷和胰周感染的可能新途徑提供理論依據(jù)，降低SAP患者的病死率和減少醫(yī)療支出。 材料方法：研究分SAP肺損傷和胰周感染兩組：肺損傷組應(yīng)用ICR清潔級小鼠210只，通過雨蛙素和脂多糖聯(lián)合

3、腹腔注射造模成功，分別取造模前(0h)和造模后6h、12h、24h、72h、168h等6個觀察點(diǎn)，每個觀察點(diǎn)處死小鼠35只，分別通過觀察其胰腺、肺臟的病理和超微結(jié)構(gòu)、肺泡Ⅱ型上皮細(xì)胞計數(shù)和活性氧代謝產(chǎn)物含量隨病程進(jìn)展的演變過程；胰周感染組應(yīng)用ICR小鼠30只，分設(shè)正常對照組、輕癥和重癥胰腺炎組各10只，造模成功后24h取其腹腔灌洗液進(jìn)行需氧和厭氧菌培養(yǎng)，流式細(xì)胞儀測定腹腔炎癥細(xì)胞的凋亡和壞死程度。數(shù)據(jù)分析利用SPSS12.0軟件包處理。

4、兩樣本均數(shù)差異用F檢驗(yàn)，數(shù)據(jù)用x±s表示；分值等級差異用Radit分析，數(shù)據(jù)用樣本例數(shù)表示。 結(jié)果：雨蛙素聯(lián)合脂多糖小鼠腹腔內(nèi)注射后，檢測小鼠的血淀粉酶和胰腺病理結(jié)構(gòu)的改變：小鼠胰腺呈現(xiàn)典型的出血、壞死病理表現(xiàn)，血淀粉酶值明顯升高，并于造模后24小時達(dá)到峰值，之后開始下降。造模后小鼠肺臟病理結(jié)構(gòu)改變表現(xiàn)為肺不張，肺泡滲出增多，炎性細(xì)胞浸潤明顯。肺臟含水量測定表明實(shí)驗(yàn)組較對照組肺含水量明顯增多，且造模后96小時含水量明顯高于12小

5、時，均有顯著性差異(p＜0.01)。肺組織MDA值造模后明顯升高，并于造模后24小時升至峰值，之后開始下降，相對于對照組有顯著性差異。肺組織超微結(jié)構(gòu)顯示實(shí)驗(yàn)組Ⅱ型肺泡細(xì)胞數(shù)量減少，細(xì)胞內(nèi)板層小體逐漸排空，線粒體內(nèi)嵴模糊不清，以造模后24小時至96小時損害最為嚴(yán)重，而對照組肺超微結(jié)構(gòu)元明顯2變化。通過TTF-1多克隆抗體標(biāo)記的Ⅱ型肺泡細(xì)胞計數(shù)顯示造模后細(xì)胞數(shù)目開始下降，于造模后24～96小時降至谷值，之后有所上升，相對于對照組有顯著性差異

6、。造模后24小時細(xì)胞計數(shù)相對于6小時、12小時和168小時下降有顯著性差異。通過對正常對照組、輕癥胰腺炎組和重癥胰腺炎組小鼠的胰周繼發(fā)感染進(jìn)行相關(guān)實(shí)驗(yàn)研究，顯示其腹腔灌洗液細(xì)菌培養(yǎng)陽性率和定量以重癥胰腺炎為著，輕癥胰腺炎程度較輕，而對照組結(jié)果為陰性，結(jié)果均有顯著性差異(p＜0.01)。腹腔炎癥細(xì)胞的活性檢測顯示輕癥胰腺炎腹腔炎癥細(xì)胞已有壞死、晚期凋亡的情況發(fā)生，但以正常細(xì)胞為主，而重癥胰腺炎則顯示以壞死和晚期凋亡細(xì)胞為主，正常細(xì)胞所占比