rhBMP-2-hTGF-β-,1--膠原復(fù)合材料的初步研究.pdf

1、目的利用重組人骨形成蛋白．2(Recombinanthumanbonemorphogeneticprotein-2rhBMP-2)、人轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-pl(Humantransforminggrowthfactors．betalhTGF-p1)和I型膠原(Collagen)合成rhBMP-2／hTGF-βI／膠原復(fù)合材料，檢測(cè)rhBMP-2／hTGF-pl/膠原復(fù)合材料的生物相容性及生物學(xué)活性。 方法將rhBMP-2和hTGF-β

2、l復(fù)合到膠原中形成rhBMP-2／hTGF-βI／膠原復(fù)合材料，通過(guò)兔眼結(jié)膜刺激試驗(yàn)和溶血試驗(yàn)對(duì)rhBMP-2／hTGF-βl／膠原復(fù)合材料的生物相容性進(jìn)行初步檢測(cè)，觀察rhBMP-2／hTGF-pl／膠原復(fù)合材料對(duì)Beagle犬骨髓基質(zhì)細(xì)胞(MarrowstromacellMSC)生長(zhǎng)及增殖的影響，通過(guò)四嘩鹽(MTT)比色試驗(yàn)、堿性磷酸酶(alkalinephosphataseALP)活性檢測(cè)試驗(yàn)和鈣化結(jié)節(jié)觀察對(duì)復(fù)合材料的生物學(xué)活性進(jìn)

3、行檢測(cè)。 結(jié)果合成的rhBMP-2／hTGF-βl／膠原復(fù)合材料呈白色棉絮狀或團(tuán)塊狀。rhBMP-2／hTGF-pI／膠原復(fù)合材料的生理豁水浸泡液對(duì)兔眼結(jié)膜連續(xù)接觸14天后，兔眼結(jié)膜無(wú)刺激反應(yīng)，涂片檢查兔眼球結(jié)膜表皮細(xì)胞無(wú)炎癥細(xì)胞：rhBMP-2／hTGF-βl／膠原復(fù)合材料的生理赫水浸泡液對(duì)兔血的溶血率為．1．639％，低于5％的標(biāo)準(zhǔn)。四唑鹽(MTT)比色試驗(yàn)和堿性磷酸酶含量檢測(cè)所得數(shù)據(jù)均用統(tǒng)計(jì)學(xué)SPSSl3．0軟件進(jìn)行方差分

4、析，所得結(jié)果組間差異顯著(P<0．01)，其中濃度為8ng／ml的hTGF-pI對(duì)P3代Beagle犬骨髓基質(zhì)細(xì)胞(MSC)的增殖和堿性磷酸酶的含量起抑制作用，濃度為80ng／ml的rhBMP-2對(duì)P3代Beagle犬骨髓基質(zhì)細(xì)胞(MSC)的增殖和堿性磷酸酶的含量起促進(jìn)作用，rhBMP-2濃度為80ng／mlhTGF-pl濃度為8ng／ml的rhBMP-2／hTGF-βl／膠原復(fù)合材料對(duì)P3代Beagle犬骨髓基質(zhì)細(xì)胞(MSC)的增殖和

5、堿性磷酸酶的含量起抑制作用；rhBMP-2濃度為lOOng／mlhTGF-pI濃度為10ng／ml的rhBMP-2／hTGF-pl／膠原復(fù)合材料鈣化結(jié)節(jié)觀察中實(shí)驗(yàn)組鈣化面積的百分率大于對(duì)照組，P<0．05，組間差異顯著。 結(jié)論本研究合成的rhBMP-2／hTGF-βl／膠原復(fù)合材料屬于無(wú)刺激性物質(zhì)，對(duì)表皮細(xì)胞無(wú)刺激作用，對(duì)兔血無(wú)溶血作用，具有良好的生物相容性。rhBMP-2／hTGF-β1／膠原復(fù)合材料明顯影響體外培養(yǎng)的Beag