磷酸鈣納米顆粒作為蛋白質載體的研究.pdf

1、蛋白質能催化生化反應，組成受體和細胞膜通道，提供細胞骨架支持，在細胞內轉運分子，是體內功能最多樣化的生物大分子。蛋白質藥物廣泛的應用于癌癥治療、疫苗、再生藥物、治療基因缺陷疾病和成像等領域。然而，由于蛋白質特有的性質，比如較大的體積、不同的表面電勢、易受損傷的三級結構，將目標蛋白運載入細胞內有很多阻礙。所以蛋白質運載策略中最大的挑戰(zhàn)是在不破壞蛋白質結構和生物活性的前提下將蛋白運載到細胞質。大多數(shù)蛋白質運載體系依賴于細胞的內吞作用。因此，

2、被運載的目標蛋白很容易在內體/溶酶體弱酸性的采環(huán)境中被降解，進而無法到達目標的亞細胞區(qū)域發(fā)揮作用?；谝陨显?，我們用了一種pH敏感的納米生物材料，來避免目標蛋白在內體/溶酶體中降解，并有效的釋放到細胞質中。磷酸鈣納米顆粒是pH敏感的蛋白質運載體系，有很好的生物相容性和生物降解性。在本論文中，我們以磷酸鈣納米顆粒為基礎建立了一種有效的細胞內蛋白質運載體系。
　　我們設計了一種簡單低成本的磷酸鈣納米顆粒制備方法，檢測了納米顆粒各方面

3、的性質，包括顆粒粒徑、顆粒形態(tài)、載藥率、包封率、pH敏感性質和穩(wěn)定性。磷酸鈣納米顆粒有很好的分散性并保持穩(wěn)定的粒徑。在內體/溶酶體的弱酸性環(huán)境中，蛋白能很快從顆粒上釋放，而在生理環(huán)境(pH=7.4)中能保持穩(wěn)定。
　　然后，我們進一步研究了磷酸鈣納米顆粒的細胞攝取、蛋白在細胞內的釋放情況以及顆粒上負載蛋白的生物活性。一方面，我們通過熒光顯微鏡和流式細胞術來研究磷酸鈣納米顆粒的細胞攝取情況;結果表明顆粒能成功有效的被細胞攝取。由于內