SENP1與MLL3在急性白血病中作用及機制研究.pdf

1、第一部分：SENP1調(diào)節(jié)c-Myb在急性淋巴細胞白血病中作用及機制研究
　　背景與目的:
　　急性淋巴細胞白血病(Acute lymphoblastic leukemia ALL)是造血系統(tǒng)的惡性克隆性疾病,占兒童急性白血病的發(fā)病率第一,現(xiàn)有的研究已顯示ALL的發(fā)生與染色體及一些基因的異常有關(guān),但是目前為止ALL的發(fā)病機制尚未完全清楚。多數(shù)研究集中在染色體、基因的DNA及轉(zhuǎn)錄水平異?！，F(xiàn)有研究顯示蛋白質(zhì)翻譯后修飾在腫瘤的發(fā)生

2、發(fā)展起著重要的作用,而 SUMO化修飾是蛋白質(zhì)翻譯后修飾重要修飾方式,SUMO特異性蛋白酶1(SUMO-specific protease1,SENP1)可催化大量蛋白的去SUMO化,其與多種腫瘤發(fā)生發(fā)展相關(guān),研究發(fā)現(xiàn)c-Myb在造血分化/轉(zhuǎn)化中發(fā)揮重要作用,我科前期研究發(fā)現(xiàn)AML骨髓中SENP1和c-Myb的高表達存在相關(guān)性,且SENP1與c-Myb之間存在相互作用的位點,因此我們推測在ALL中SENP1可能介導(dǎo)c-Myb的SUMO化

3、修飾,參與ALL的發(fā)病機制。本文通過在ALL患者骨髓標本中檢測SENP1、c-Myb基因表達并分析其相關(guān)性,為闡明SENP1、c-Myb在ALL中的作用、機制及與預(yù)后的關(guān)系提供臨床依據(jù)。
　　方法:
　　選取經(jīng)確診ALL例數(shù)31例,其中T-ALL1例,B-ALL22例,未分類ALL8例。根據(jù)ALL危險評估將患者分為低/中危組、高危組,分別是6例、25例,及正常對照組31例。采用real-time PCR法及免疫細胞化學染色(

4、SP法)檢測SENP1、c-Myb在ALL及正常對照組骨髓標本中mRNA及其蛋白表達。
　　結(jié)果:
　　ALL患者骨髓標本中SENP1、c-Myb均是高表達,與正常對照組之間的表達差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05),Pearson相關(guān)性分析發(fā)現(xiàn)SENP1與c-Myb高表達呈正相關(guān)。SENP1、C-Myb的表達在高危組高于低/中危組,但差異無統(tǒng)計學意義。
　　結(jié)論:
　　ALL組骨髓標本中存在著SENP1、c-Myb

5、的高表達,且呈正相關(guān),提示SENP1、c-Myb可能參與ALL的發(fā)生、發(fā)展。
　　第二部分：一個急性髓細胞白血病及結(jié)直腸癌家系全外顯子測序與MLL3基因突變的研究
　　背景及目的:
　　我們接診的一名白血病患者其家系中多個癌癥患者,其中先證者及其弟弟先后罹患急性髓細胞白血病,其母親、舅舅、小姨分別罹患結(jié)腸癌、直腸癌、直腸壞死。我們推測遺傳因素可能是發(fā)生多個癌癥患者的原因,因此我們對該家系中多人進行了全外顯子組測序,以尋

6、找該家系中發(fā)病相關(guān)的遺傳突變。
　　方法:
　　收集該家系中7人的骨髓及或外周血標本,用全基因組提取試劑盒提取其DNA,經(jīng)酶標儀測DNA濃度及質(zhì)量,凝膠電泳檢測DNA完整性,外送至北京貝瑞和康生物有限公司行全外顯子組測序。
　　結(jié)果:
　　通過外顯子測序發(fā)現(xiàn)該家系中多人帶有MLL3基因在7號染色體的插入突變,插入開始于外顯子14的817密碼子,終止于827密碼子,導(dǎo)致MLL3基因發(fā)生“a frame shift