有氧運(yùn)動(dòng)通過上調(diào)膽堿能抗炎通路改善自發(fā)性高血壓大鼠血管胰島素抵抗.pdf

1、高血壓是動(dòng)脈粥樣硬化、心肌梗塞、中風(fēng)和心衰等心血管疾病的主要危險(xiǎn)因素?；A(chǔ)和臨床實(shí)驗(yàn)均證實(shí)有氧運(yùn)動(dòng)能夠降低血壓，但其機(jī)制尚不清楚。
　　血管胰島素抵抗是高血壓發(fā)生發(fā)展過程中重要病理生理機(jī)制之一。在血管胰島素抵抗?fàn)顟B(tài)下，胰島素作用于血管內(nèi)皮細(xì)胞釋放的舒血管物質(zhì)一氧化氮（NO）減少，而釋放的縮血管物質(zhì)內(nèi)皮素-1（ET-1）相對(duì)增多。NO與ET-1的失衡導(dǎo)致血管阻力增加，促進(jìn)高血壓的發(fā)生，因此改善血管胰島素抵抗有益于高血壓的防治。

2、>　　自主神經(jīng)功能紊亂尤其是副交感神經(jīng)功能低下與胰島素抵抗的發(fā)生密切相關(guān)，且自主神經(jīng)功能紊亂通常發(fā)生于胰島素抵抗之前。近年研究還發(fā)現(xiàn)，副交感神經(jīng)具有免疫調(diào)節(jié)功能。副交感神經(jīng)末梢釋放的神經(jīng)遞質(zhì)乙酰膽堿（ACh）可作用于細(xì)胞膜α7型煙堿乙酰膽堿受體（α7 nicotinic acetylcholine receptor，α7nAChR），激活Jak2/STAT3信號(hào)通路，發(fā)揮抗炎作用，即膽堿能抗炎通路。高血壓患者自主神經(jīng)功能紊亂，降低的副交

3、感神經(jīng)活性以及被抑制的膽堿能抗炎通路可能導(dǎo)致 TNF-α和C反應(yīng)蛋白等炎癥介質(zhì)介導(dǎo)的炎癥反應(yīng)增強(qiáng)。
　　由于有氧運(yùn)動(dòng)對(duì)自主神經(jīng)系統(tǒng)具有調(diào)節(jié)作用，能夠減輕自主神經(jīng)功能紊亂，因此我們提出假設(shè)：有氧運(yùn)動(dòng)能夠通過增強(qiáng)副交感神經(jīng)功能及膽堿能抗炎通路，減輕血管胰島素抵抗從而起到防治高血壓的作用。
　　實(shí)驗(yàn)?zāi)康?
　　1.明確有氧運(yùn)動(dòng)能否延緩自發(fā)性高血壓大鼠（SHR）血壓升高及改善小血管胰島素抵抗；
　　2.若能，探討有氧運(yùn)動(dòng)

4、是否通過上調(diào)膽堿能抗炎通路改善血管胰島素抵抗及其主要機(jī)制。
　　實(shí)驗(yàn)方法
　　1.有氧運(yùn)動(dòng)動(dòng)物模型的建立。8周齡雄性 SHR和WKY大鼠各8只，進(jìn)行8周無負(fù)重游泳訓(xùn)練（1 h/d，5 d/wk）。
　　2.激動(dòng)劑處理。采用腹腔注射法給予8周齡雄性SHR和WKY大鼠α7nAChR選擇性激動(dòng)劑PNU-282987治療4周（0.5 mg/kg/d），對(duì)照組接受生理鹽水腹腔注射4周（n=8）。
　　3.采用無創(chuàng)尾動(dòng)脈血壓

5、儀測(cè)量大鼠尾動(dòng)脈血壓，每2周測(cè)量一次。
　　4.采用離體血管張力測(cè)定系統(tǒng)測(cè)定腸系膜血管胰島素舒張反應(yīng)。
　　5.采用 Western blot方法檢測(cè)胰島素信號(hào)通路和膽堿能抗炎通路關(guān)鍵蛋白表達(dá)及磷酸化水平。
　　6.采用 ELISA法測(cè)定血清和組織中炎癥因子TNF-α和IL-1β的含量。
　　7.采用DHE染色法檢測(cè)腸系膜血管活性氧（ROS）水平。
　　實(shí)驗(yàn)結(jié)果:
　　1．8周游泳運(yùn)動(dòng)延緩SHR血壓升

6、高（190±3 mmHg vs.212±4 mmHg，P<0.05，n=8），減輕系統(tǒng)胰島素抵抗（QUIKI:0.297 vs.0.243，P<0.05，n=8）。
　　2．8周游泳運(yùn)動(dòng)改善SHR腸系膜血管對(duì)胰島素的舒張反應(yīng)（P<0.05，n=8），增強(qiáng)胰島素激活的Akt（Ser473）及eNOS（Ser1177）磷酸化水平（P<0.01，n=8）。
　　3．8周游泳運(yùn)動(dòng)降低 SHR血清、心臟和腸系膜血管炎癥因子TNF-α和

7、IL-1β水平（P<0.05，n=8）。
　　4．8周游泳運(yùn)動(dòng)增加SHR及WKY大鼠腸系膜血管和心臟膽堿能抗炎通路相關(guān)分子VAChT、α7nAChR的蛋白表達(dá)水平以及Jak2的磷酸化水平（P<0.05，n=8）。
　　5．α7nAChR選擇性激動(dòng)劑PNU-282987治療4周降低SHR血清和腸系膜血管炎癥因子TNF-α和IL-1β水平（P<0.05，n=8）。
　　6．α7nAChR激動(dòng)劑延緩SHR血壓升高（173±4

8、 mmHg vs.191±5 mmHg，P<0.05，n=8），減輕系統(tǒng)胰島素抵抗（QUICKI:0.286 vs.0.241，P<0.05，n=8）。
　　7．α7nAChR激動(dòng)劑改善SHR腸系膜血管對(duì)胰島素的舒張反應(yīng)（P<0.05，n=8），增強(qiáng)胰島素激活的Akt（Ser473）及eNOS（Ser1177）磷酸化水平（P<0.01，n=8）。
　　8．α7nAChR激動(dòng)劑降低 SHR腸系膜血管 gp91phox和SOD2