褪黑素在有氧運(yùn)動(dòng)改善自發(fā)性高血壓大鼠微動(dòng)脈舒縮功能中的作用.pdf

1、研究目的：探討褪黑素在有氧運(yùn)動(dòng)改善自發(fā)性高血壓大鼠（SHR）腸系膜動(dòng)脈功能中的作用及可能的外周血管機(jī)制。
　　研究方法：選用12周齡雄性SHR34只和正常血壓對(duì)照組Wistar-Kyoto（WKY）8只，SHR隨機(jī)分為5個(gè)組，即安靜空白對(duì)照組（SHR-SED，n=8）、安靜生理鹽水注射組（SHR-SED+vehicle，n=6）、安靜褪黑素受體阻斷劑luzindole（1mg/kg/day）注射組（SHR-SED+luz，n=6）

2、、有氧運(yùn)動(dòng)組（SHR-EX，n=8）、有氧運(yùn)動(dòng)luzindole注射組（SHR-EX+luz，n=6）。運(yùn)動(dòng)組進(jìn)行8周有氧訓(xùn)練，坡度0°，18～20m/min，60min/day，5d/wk。8周有氧運(yùn)動(dòng)后，采用尾動(dòng)脈無(wú)創(chuàng)法測(cè)量大鼠血壓與心率；WKY、SHR-SED、SHR-EX三組采用 ELISA競(jìng)爭(zhēng)法測(cè)定血清褪黑素水平、微血管環(huán)張力測(cè)定二級(jí)腸系膜動(dòng)脈的舒縮特性、Western blotting和免疫熒光共定位法檢測(cè)腸系膜動(dòng)脈的褪黑素

3、受體 MT1、MT2和eNOS蛋白的表達(dá)和分布。
　　研究結(jié)果：（1）8周有氧運(yùn)動(dòng)后，SHR-EX組的收縮壓（SBP）、舒張壓（DBP）、平均動(dòng)脈壓（MAP）和心率（HR）與SHR-SED組相比顯著降低。SHR-EX+luz組的SBP和HR明顯高于SHR-EX組，卻低于SHR-SED+luz組，而SHR-SED組與SHR-SED+vehicle和SHR-SED+luz組無(wú)差異；（2）WKY組和SHR-SED組血清褪黑素濃度在21:

4、00-22:00pm時(shí)最高，明顯高于12:00-13:00pm和8:00-9:00am；但SHR-EX組8:00-9:00am最高。在三個(gè)時(shí)間段內(nèi)，WKY組血清褪黑素濃度始終顯著高于SHR-SED組；但在8:00-9:00am時(shí)間段，SHR-EX組明顯高于WKY和SHR-SED組；（3）①微血管環(huán)在NE（10-5M）預(yù)收縮后，對(duì)褪黑素（melatonin，即MT，10-6～10-3M）呈濃度依賴性舒張反應(yīng)，pIC50值為WKY>SHR-

5、EX>SHR-SED，且各組無(wú)L-NAME（10-4M）內(nèi)皮完整血管舒張幅度大于有L-NAME（10-4M）內(nèi)皮不完整血管；②有氧運(yùn)動(dòng)可增加腸系膜動(dòng)脈對(duì)ACh的舒張反應(yīng)，其pIC50值為WKY>SHR-EX>SHR-SED；MT（10-4M）預(yù)孵育微血管環(huán)20min，可明顯的增加ACh（10-9～10-5M）的舒張反應(yīng)，但對(duì)sodium nitroprusside（ SNP，10-9～10-5M）無(wú)明顯效果；③luzindole（2×1

6、0-6M）預(yù)孵育微血管環(huán)20min，可阻斷褪黑素的舒張作用；（4）與WKY組相比，SHR-SED組腸系膜動(dòng)脈內(nèi)MT1、MT2和eNOS表達(dá)均顯著下調(diào)，有氧運(yùn)動(dòng)后，SHR-EX組MT1、MT2和eNOS表達(dá)均明顯上調(diào)，但仍然低于WKY組；（5）免疫熒光共定位檢測(cè)MT2蛋白位于整個(gè)腸系膜動(dòng)脈的血管層，存在細(xì)胞外膜、血管平滑肌細(xì)胞層和內(nèi)皮細(xì)胞層，eNOS蛋白主要存在于腸系膜動(dòng)脈的內(nèi)皮細(xì)胞層，MT2和eNOS蛋白二者共定位于腸系膜動(dòng)脈的內(nèi)皮細(xì)胞