免疫抑制狀態(tài)下新西蘭大白兔肺部真菌感染模型建立的研究.pdf

1、目的：建立適合影像學(xué)研究使用的新西蘭大白兔的新型隱球菌、白念菌、煙曲霉菌肺炎動物模型,為進(jìn)一步的臨床、病理、影像學(xué)診斷對照研究打下基礎(chǔ)。 材料與方法：選擇健康雄性新西蘭大白兔72只,分為新型隱球菌組、自念菌組、煙曲霉組,每組中設(shè)立實(shí)驗組18只,對照組6只,新型隱球菌對照組為未注射免疫抑制劑,而接種了新型隱球菌懸浮液,白念菌組和曲霉菌組對照組為注射了免疫抑制劑而注射了等量的生理鹽水。新型隱球菌實(shí)驗組和白念菌組使用相同的方法使兔達(dá)到

2、免疫抑制狀態(tài)：于實(shí)驗第1-5天,每日耳緣靜脈注射阿糖胞苷440mg/m2,6天后隔日一次維持免疫抑制狀態(tài)。第4日起,所有兔給予萬古霉素15mg/kg、頭孢他定150mg/kg靜脈注射,每日1次；慶大霉素5mg/kg靜脈注射,隔日1次預(yù)防細(xì)菌感染。于第6日行經(jīng)皮氣管內(nèi)穿刺法分別接種配置好新型隱球菌0.4ml(濃度2.5×108個/ml)懸浮液和白念菌懸浮液0.2ml(濃度5×108個/ml)的懸浮液,白念菌對照注射等量的生理鹽水。煙曲霉組

3、于實(shí)驗第1-5天、第8、9天,每日耳緣靜脈注射阿糖胞苷525mg/m2、第1-2天每日耳緣靜脈注射甲基強(qiáng)地松龍5mg/kg,第4天起給予萬古霉素15mg/kg、頭孢他定150mg/kg靜脈注射,每日1次；慶大霉素5mg/kg靜脈注射,隔日1次預(yù)防細(xì)菌感染,于第2日行經(jīng)皮氣管內(nèi)穿刺法接種配置好的0.4m1煙曲霉懸浮液(濃度為1×108個/ml),對照組注射等量的生理鹽水。每組分別于實(shí)驗前和接種前抽耳緣靜脈血做血常規(guī)檢查了解粒細(xì)胞值的變化。

4、每組所用兔在實(shí)驗開始時進(jìn)行一次胸部CT檢查,接種后每隔一天行胸部CT檢查了解肺部的影像學(xué)表現(xiàn),并于接種后每2-3天隨機(jī)處死3-4只肺部有陽性表現(xiàn)兔(如有兔死亡量酌減),無菌操作下剖胸取出肺組織標(biāo)本行真菌培養(yǎng)和病理檢查,了解上述真菌在肺內(nèi)的生長和致病情況。 結(jié)果： 1、三種組兔耳緣靜脈血粒細(xì)胞計數(shù)在注射免疫抑制劑后明顯降低,行配對t檢驗P<0.05,有統(tǒng)計學(xué)意義。 2、新型隱球菌組的實(shí)驗組接種成功率為100％(18

5、/18),模型建立成功率為83.33％(15/18)。對照組模型建立成功率為33.33％(2/6),與實(shí)驗組統(tǒng)計學(xué)有明顯差異。 3、白念菌組的實(shí)驗組接種成功率為100％(18/18),模型建立成功率為88.89％(16/18)。對照組模型建立成功率為16.6796(1/6),與實(shí)驗組統(tǒng)計學(xué)有明顯差異。 4、煙曲霉組的實(shí)驗組接種成功率為100％(18/18),模型建立成功率88.89％(16/18),對照組接種和模型成功率