烏司他丁對(duì)免疫抑制狀態(tài)下重癥肺部感染小鼠巨噬細(xì)胞分化的影響.pdf

1、背景：重癥肺部感染是臨床常見(jiàn)的移植術(shù)后急危重癥，免疫抑制狀態(tài)下過(guò)度炎癥發(fā)病機(jī)制較復(fù)雜病死率高。各類(lèi)肺內(nèi)及肺外影響因素導(dǎo)致各種各樣的炎癥介質(zhì)的釋放。巨噬細(xì)胞亞群是重要的炎性反應(yīng)調(diào)節(jié)細(xì)胞，其在炎性反應(yīng)過(guò)程當(dāng)中分泌不同的細(xì)胞因子、趨化因子導(dǎo)致“細(xì)胞因子風(fēng)暴”，使炎癥反應(yīng)不斷擴(kuò)大，巨噬細(xì)胞作為細(xì)胞因子風(fēng)暴的啟動(dòng)細(xì)胞，而后間接或直接地參與過(guò)度炎癥反應(yīng)過(guò)程，致使機(jī)體失控的炎性反應(yīng)，造成惡性循環(huán)加劇機(jī)體損傷。
　　目的：觀察免疫抑制狀態(tài)下重癥肺

2、部感染小鼠肺組織及肺泡灌洗液(BALF)中巨噬細(xì)胞的數(shù)目和促炎和抗炎因子的變化及烏司他丁干預(yù)后其變化;探討免疫抑制狀態(tài)下重癥肺部感染的發(fā)病機(jī)制及烏司他丁的干預(yù)效果。方法30只雄性Balb/c小鼠隨機(jī)分為正常組、模型組、烏司他丁組，每組10只;采用甲基強(qiáng)的松龍和內(nèi)毒素制備免疫低下急性肺損傷小鼠模型，隨后用烏司他丁干預(yù)治療。檢測(cè)氣管給藥后3h、6h各組小鼠的呼吸頻率(R)，氣管給藥后6h烏拉坦麻醉處死小鼠收集并檢測(cè)肺泡灌洗液(BALF)中肺

3、泡巨噬細(xì)胞及中性粒細(xì)胞的數(shù)量，肺組織切片HE染色觀測(cè)病理變化，采用免疫組化法檢測(cè)肺組織CD163的陽(yáng)性表達(dá)，實(shí)時(shí)定量PCR檢測(cè)肺泡灌洗液(BALF)中M1型標(biāo)記物(TNF-α、IL-6、INOS) mRNA的表達(dá);real-timePCR檢測(cè)肺泡灌洗液(BALF) M2型標(biāo)記物(CD206、Arg-1、IL-10) mRNA的表達(dá)。
　　結(jié)果：⑴模型組較正常組小鼠呼吸淺快，偶有出現(xiàn)點(diǎn)頭呼吸，呼吸窘迫現(xiàn)象，呼吸頻率增快，烏司他丁組較

4、模型組小鼠呼吸平緩，偶有出現(xiàn)呼吸急促，呼吸平穩(wěn)，呼吸頻率放慢。⑵肺組織大體觀:正常組肺組織表面質(zhì)地柔軟、彈性良好，組織密度均勻，包膜完整光滑，顏色淺紅;模型組肺組織彌漫性大面積出血，組織腫脹，顏色不均勻;烏司他丁組肺組織腫脹充血，但較模型組肺組織損傷程度輕，沒(méi)有大的局灶性出血，散在出血點(diǎn)。⑶肺組織病理形態(tài)學(xué)改變:正常組肺組織肺泡壁較薄，結(jié)構(gòu)清晰完整，肺泡間隔和肺泡腔內(nèi)無(wú)炎性細(xì)胞匯集、浸潤(rùn)，肺組織中的血管無(wú)明顯破裂、擴(kuò)張;模型組肺組織破壞

5、嚴(yán)重，肺泡結(jié)構(gòu)不完整，肺泡壁塌陷，肺泡囊破裂，有大肺泡的形成，肺泡腔內(nèi)大量的紅細(xì)胞、炎性細(xì)胞浸潤(rùn)，甚至肺泡腔結(jié)構(gòu)消失;肺泡水腫，肺間質(zhì)增寬;烏司他丁組肺組織病變較模型組輕，但也有肺泡結(jié)構(gòu)不完整，肺泡腔炎性細(xì)胞浸潤(rùn)等改變。⑷模型組較正常組BALF中的巨噬細(xì)胞和中性粒細(xì)胞數(shù)目增多;烏司他丁組較模型組巨噬細(xì)胞和中性粒細(xì)胞數(shù)目減少，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。⑸模型組較正常組肺組織中CD163陽(yáng)性率的表達(dá)增高差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.

6、05)。⑹模型組較正常組BALF中M1型標(biāo)記物(TNF-α、IL-6、INOS)的mRNA的表達(dá)均降低(P＜0.05)。烏司他丁組較模型組BALF中M1型標(biāo)記物(TNF-α、IL-6、INOS)的mRNA的表達(dá)均降低差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。模型組較正常組BALF中M2型標(biāo)記物(CD206、Arg-1、IL-10)的mRNA的表達(dá)均增高(P＜0.05);烏司他丁組較模型組BALF中M2型標(biāo)記物(CD206、Arg-1、IL-1