在異種移植中血紅素氧化酶-1對內(nèi)皮細(xì)胞的保護(hù)作用及其機(jī)制的研究.pdf

1、目前，等待移植器官和組織的病人的量遠(yuǎn)遠(yuǎn)超過可得到的人類供體。異種移植被認(rèn)為是解決日益嚴(yán)重的供體器官短缺的潛在方法，豬被認(rèn)為是最合適的器官供者。豬器官移植至人是非協(xié)調(diào)性異種移植，這種移植首先遭遇的障礙是超急性排斥反應(yīng)(HAR)，目前已隨著轉(zhuǎn)基因豬的出現(xiàn)而被初步克服。延遲性異種排斥(DXR)代表著下一個(gè)重要的免疫學(xué)障礙。研究表明，異種移植物引起的延遲性異種排斥反應(yīng)與內(nèi)皮細(xì)胞活化有關(guān)。另外，多種炎癥細(xì)胞如NK細(xì)胞對移植物的識別、浸潤和損害也是

2、DXR的重要特征。血紅素氧化酶(HO-1)是一種細(xì)胞保護(hù)基因，在多種應(yīng)激和同種移植模型中起重要的作用。 本文首先采用20％人血清(HS)刺激培養(yǎng)豬主動脈血管內(nèi)皮細(xì)胞(PAEC)的方式作為豬對人異種移植的體外模型。通過100μM鈷原卟啉(CoPP)預(yù)處理12h誘導(dǎo)PAEC過度表達(dá)HO-1，分別以Western印跡法和膽紅素生成法檢測HO-1的蛋白表達(dá)和酶的活性。 研究發(fā)現(xiàn)，術(shù)前24h腹腔注射CoPP誘導(dǎo)供肝HO-1mRNA

3、和蛋白顯著上調(diào)。HO-1可以減輕移植術(shù)后肝臟的損害，減少炎癥細(xì)胞浸潤，延遲排斥反應(yīng)的發(fā)生，延長移植物的存活時(shí)間(HO-1誘導(dǎo)組15.5h±3.8hVS0.9％NS對照組7.3h±2.1h和HO-1抑制組6.7h±2.9h，P＜0.01)，這與抑制內(nèi)皮細(xì)胞的激活有明顯關(guān)系(E-選擇素的平均光密度為0.112±0.039VS0.211±0.030，P＜0.01)。結(jié)論實(shí)驗(yàn)表明，在體外試驗(yàn)中，誘導(dǎo)HO-1可以顯著抑制HS對PAEC的激活作用，