3，4-二氯苯胺對雄性大鼠生殖系統(tǒng)的毒性效應(yīng).pdf

1、目的：二氯苯胺作為除草劑、殺蟲劑和偶氮染料合成和降解的中間體,有廣泛的途徑進入并積存在人類環(huán)境中,對人類健康構(gòu)成危害。本文從六個方面探討了3,4-二氯苯胺對雄性大鼠生殖系統(tǒng)的影響,對于研究苯胺類物質(zhì)的生殖毒性機理,提供了基礎(chǔ)研究資料。對預(yù)防環(huán)境污染和保護人類生殖健康具有重要意義。 方法：雄性性成熟Wistar大鼠40只,平均體重250克。隨機分為5組,每組8只。分別為溶劑對照組(灌胃玉米油)和四個二氯苯胺暴露組(劑量分別為39m

2、g/kg,81mg/kg,170mg/kg和357mg/kg)。每只大鼠每天灌胃一次,每次劑量為0.5ml/100g,連續(xù)五周。于末次暴露24小時后將動物處死,稱量體重及各臟器重。進行如下實驗：1、采用石蠟切片-HE染色法光鏡下觀察睪丸和附睪組織病理變化；透射電鏡觀察睪丸支持細(xì)胞和生精細(xì)胞亞顯微結(jié)構(gòu),附睪精子亞顯微結(jié)構(gòu)。2、采用組合酶-percoll梯度法純化睪丸生精細(xì)胞,單細(xì)胞凝膠電泳檢測生精細(xì)胞DNA損傷。3、血細(xì)胞計數(shù)法檢測附睪精

3、子密度和精子畸形率；臺盼藍染色法檢測精子存活率。4、紫外分光光度法檢測精子頂體酶活性變化。5、考馬斯亮藍染色法體外檢測精子頂體反應(yīng)率變化。6、單細(xì)胞凝膠電泳技術(shù)檢測精子DNA損傷。 結(jié)果： 1.隨著二氯苯胺暴露劑量的增加,357mg/kg劑量組大鼠體重明顯降低(P<0.05),其他劑量組大鼠的終體重有減小趨勢,但平均體重與溶劑對照組比較差異不顯著。隨二氯苯胺濃度的增加,各組大鼠脾臟平均重量極顯著增大(P<0.01)。各組

4、大鼠胸腺重量也表現(xiàn)出減小趨勢,但是除357mg/kg劑量組外,其他各組胸腺重與對照組比較無明顯差異。另外,357mg/kg劑量組的睪丸系數(shù)有明顯增加(P<0.01),其他劑量組的睪丸系數(shù)變化不明顯。 2.隨著暴露劑量的增加,睪丸組織中曲細(xì)精管外壁皺褶增多,管內(nèi)細(xì)胞層數(shù)減少,細(xì)胞質(zhì)濃度降低,管腔直徑增大,精子數(shù)目減少。附睪中精子數(shù)目減少；電鏡觀察發(fā)現(xiàn)170mg/kg劑量的二氯苯胺暴露后,睪丸支持細(xì)胞和生精細(xì)胞內(nèi)空泡增多,細(xì)胞核內(nèi)異

5、染色質(zhì)增多；附睪中精子中段線粒體受損,尾段微管遭到破壞。 3.彗星實驗發(fā)現(xiàn),大鼠染毒二氯苯胺以后,睪丸生精細(xì)胞彗星的尾長很顯著增加(P<0.01)。生精細(xì)胞的尾長/頭長值顯著增加(P<0.01)。Olive尾矩也顯著增加(P<0.01)。 4.170mg/kg劑量組附睪精子密度顯著減小(P<0.05),357mg/kg劑量組精子密度極明顯減小(P<0.01);精子存活率方面,81mg/kg、170mg/kg、357mg/

6、kg劑量組與對照組比較均極明顯降低(P<0.01);精子畸形率中39mg/kg、81mg/kg和170mg/kg劑量組明顯升高(P<0.05),357mg/kg劑量組有極顯著升高(P<0.01)。5精子頂體酶活性檢測結(jié)果表明,81mg/kg劑量組與對照組比較顯著降低(P<0.05),170mg/kg、357mg/kg劑量組酶活性極明顯降低(P<0.01)。6 體外檢測各組精子頂體反應(yīng)率結(jié)果表明,5、10、20、40μg/ml劑量的二氯苯

7、胺對精子項體反應(yīng)率有極明顯抑制作用(P<0.01)并且表現(xiàn)出劑量依賴關(guān)系。7 彗星實驗檢測精子DNA損傷結(jié)果表明,與對照組比較,170mg/kg和357mg/kg劑量組精子細(xì)胞彗星尾長、Olive尾矩、尾長/頭長比等指標(biāo)與對照組比較均有極顯著性差異(P<0.01)。以上所得結(jié)果均呈現(xiàn)明顯的劑量-效應(yīng)關(guān)系,具有統(tǒng)計學(xué)意義。 結(jié)論：3,4-二氯苯胺能夠造成雄性大鼠睪丸和附睪組織病理變化,對睪丸支持細(xì)胞、生精細(xì)胞均具有損傷,能夠降低精