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文檔簡介
1、第一章不同生育能力供精者精子蛋白AKAP4、GAPDHS和SPANX的差異表達研究
目的:
從蛋白質(zhì)水平探討不同生育能力供精者精子蛋白的改變,尋找?guī)追N與供精者精子生育能力相關(guān)的可能蛋白質(zhì)標(biāo)志物,為更好地篩查供精者提供新的指標(biāo)。
材料和方法:
收集在精子庫里連續(xù)做12個不同受者的AID周期治療一次也未成功的供精者的精液(低生育組)、AID成功率在20%-30%之間的的供精者的精液(正
2、常對照組)和AID成功率在50%以上的供精者的精液(高生育組),各10人,每人捐獻3次。
運用CASA分析精子活力,Percoll密度梯度離心技術(shù)分離純化精子,RIPA裂解結(jié)合超聲法提取蛋白,BCA試劑盒測定蛋白濃度,SDS-PAGE電泳技術(shù)分離不同生育能力供精者精子標(biāo)本的總蛋白質(zhì),結(jié)合熒光免疫、Western blotting技術(shù)篩選差異蛋白質(zhì)。
結(jié)果:
隨著供精者生育能力的下降,精子中AKA
3、P4、GAPDHS和SPANX這三種蛋白表達減少,且差異蛋白質(zhì)大多與精子活力有關(guān)。
結(jié)論:
綜上所述,供精者生育能力與精子蛋白質(zhì)差異表達有關(guān),主要差異蛋白AKAP4、GAPDHS和SPANX可作為評估男性生育能力的生物標(biāo)志物,精子的活動力可能與男性生育能力有關(guān)。
第二章 A23187誘發(fā)頂體反應(yīng)率在宮腔內(nèi)人工授精中的臨床應(yīng)用價值
目的:
探討精子頂體反應(yīng)(AR)與宮腔
4、內(nèi)人工授精(IUI)臨床妊娠率的關(guān)系,以期指導(dǎo)IUI臨床工作。
材料和方法:
以我院2010年1月~2010年12月接受IUI治療的128例患者為研究對象,Percoll密度梯度離心技術(shù)分離純化精子,模擬生理情況下精子進入女性生殖道后的頂體反應(yīng),在體外用Ca2+載體A23187誘發(fā)AR,F(xiàn)ITC-PSA熒光染色,最后在熒光顯微鏡下觀察,計算自發(fā)AR率和誘發(fā)AR率,收集臨床資料,SPSS統(tǒng)計學(xué)處理實驗數(shù)據(jù),分析
5、精子AR率與IUI臨床妊娠率的關(guān)系。
結(jié)果:
1、妊娠組與非妊娠組相比,自發(fā)AR率在統(tǒng)計學(xué)上無顯著性的差異(P>0.05),誘發(fā)AR率在統(tǒng)計學(xué)上有顯著性的差異(P<0.05);
2、誘發(fā)AR率≤20%、20%~50%和≥50%三組相比,其IUI臨床妊娠率在統(tǒng)計學(xué)上有顯著性的差異(4.8%vs12.5%vs18.6%,P<0.05)。
結(jié)論:
自發(fā)AR率與IUI臨床妊娠
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