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文檔簡介
1、目的:探討海參花提取物對雌性小鼠生殖系統(tǒng)的影響作用,為海參花的進一步開發(fā)利用提供一定的理論依據(jù)。
方法:
1、采用水溶液超聲輔助提取的方法得到海參花中的水溶物;采用乙醇等有機溶劑提取的方法得到海參花中的醇溶物。
2、采用電感耦合等離子體質(zhì)譜法(ICP-MS)測定干粉中微量元素含量;按照GB5009相關(guān)標準測定干粉中水分、灰分、蛋白質(zhì)和脂肪含量。
3、90只昆明小鼠隨機分成9組:空白組,模型組,海參
2、花水提物低、中、高(150、300、600mg·kg-1)劑量組,海參花醇提物低、中、高(150、300、600mg·kg-1)劑量組,戊酸雌二醇組(0.085mg·kg-1)。連續(xù)5天腹腔注射環(huán)磷酰(CP,28mg/kg),每天1次,建立卵巢早衰模型;同時治療組連續(xù)四周每天灌胃不同劑量的藥物1次。觀察小鼠形態(tài),計算子宮、卵巢、脾、胸腺等臟器指數(shù),檢測血清中雌二醇、孕酮含量,觀察卵巢、子宮組織形態(tài),測量子宮內(nèi)膜厚度,測定卵巢、子宮中蛋白
3、含量、MDA水平和SOD、GSH-Px活性。應用免疫組化的方法檢測卵巢、子宮細胞凋亡率以及Bax、Bcl-2、Caspase-3蛋白的表達情況。
結(jié)果:
1、水溶液超聲輔助提取,液料比1.5倍,30℃條件下超聲25min,提取2h,提率為8.1%;有機溶劑提取,液料比10倍,30℃條件下提取3h,提率為20.3%。
2、海參花干粉中不僅含有大量的Fe,Ca,Mg,Zn,更含有Se,Ge,Sr,Cu等對人體非
4、常有益的微量元素,另外蛋白質(zhì)含量豐富,達到61.7%。
3、與空白組比較,模型組小鼠的子宮、卵巢、胸腺等臟器指數(shù)均明顯降低(P<0.05),各用藥組的臟器指數(shù)均能得到顯著提高(P<0.05),甚至接近于正常組。
4、與空白組相比,模型組小鼠的雌二醇、孕酮含量顯著降低(P<0.05),且子宮內(nèi)膜明顯變薄(P<0.01)。相比于模型組,海參花提取物各用藥組均能提高血清中雌二醇以及孕酮含量(P<0.05),且明顯增加子宮內(nèi)
5、膜厚度(P<0.05)。
5、與空白組相比,模型組小鼠的子宮內(nèi)膜腺體數(shù)目少,腺腔小,間質(zhì)致密,間質(zhì)細胞多呈梭形,血管較少,腺上皮呈假復層現(xiàn)象。各用藥組小鼠的子宮內(nèi)膜腺體數(shù)目明顯增多,腺腔較大,子宮內(nèi)膜明顯增厚,間質(zhì)疏松,間質(zhì)細胞多以圓形為主,少部分為梭形,間質(zhì)細胞血管豐富,腺上皮細胞呈單層柱狀。
6、與空白組相比,模型組小鼠的卵巢體萎縮,發(fā)育較差,卵泡生長少,未見典型成熟卵泡,部分被纖維組織所代替,顆粒細胞排列不規(guī)整
6、。各用藥組小鼠的卵巢體積較大,發(fā)育良好,原始卵泡和生長卵泡數(shù)量均有所增多,偶見成熟卵泡,顆粒細胞層次較多、排列整齊。
7、與空白組相比,模型組小鼠的子宮、卵巢蛋白含量、SOD、GSH-Px活性降低,MDA水平顯著提高(P<0.05),相對于模型組,各用藥組均能得到明顯改善(P<0.05)。
8、與空白組相比,模型組小鼠的子宮、卵巢細胞凋亡率、Bax和Caspase-3表達增加,Bcl-2表達顯著降低(P<0.05),
7、相對于模型組,各用藥組均能得到明顯改善(P<0.05)。
結(jié)論:
1、海參花中既含有水溶性物質(zhì)又含有醇溶性物質(zhì)。
2、海參花干粉中含有大量人體所需的微量元素,并且高蛋白、低脂肪,營養(yǎng)價值豐富。
3、海參花提取物通過提高小鼠血清中激素含量,增加臟器指數(shù)和子宮內(nèi)膜厚度,同時增加卵泡數(shù)量,改善卵巢形態(tài),保護小鼠的生殖系統(tǒng)。
4、海參花提取物通過增加總蛋白含量,提高SOD、GSH-Px的活性,降
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