出生前DEHP暴露對雌性子代大鼠生殖系統(tǒng)發(fā)育的影響.pdf

1、目的:
　　探討出生前暴露鄰苯二甲酸二（2-乙基己）酯（DEHP）對子代雌性大鼠生殖系統(tǒng)發(fā)育的影響及其作用機(jī)制。
　　方法:
　　性成熟SPF級Sprague-Dawley大鼠，按雌雄1：1合籠交配。若受孕，從此日起定為G0，每日稱量孕鼠體重并觀察孕鼠飲食攝水情況。將獲得的40只孕鼠按體重隨機(jī)分為溶劑對照組（玉米油）以及2mg/kg、10mg/kg、50mg/kg三個(gè)劑量組，每組10只。孕鼠自G14~G19連續(xù)灌胃染毒

2、，灌胃體積為1ml/100g體重。F1代子鼠出生后第一天定為PND0，記錄新生鼠體重、肛門生殖器距離（AGD）、各窩產(chǎn)仔數(shù)和性別比以及是否存在死胎、畸胎情況。F1代子鼠出生后第21天斷乳，斷乳后雌雄分籠飼養(yǎng)，每周測量雌性大鼠體重。雌性子代大鼠分籠飼養(yǎng)后，每日檢查其陰道是否開口，以陰道開口日齡作為青春期開始的標(biāo)志。雌性大鼠陰道開口后，每日觀察陰道脫落細(xì)胞形態(tài)學(xué)變化并記錄雌鼠動(dòng)情周期。F1代雌性大鼠飼養(yǎng)至70日齡左右，于動(dòng)情間期稱重、測量A

3、GD后斷頭處死并取血分裝血清，稱量子宮以及卵巢濕重并計(jì)算臟器系數(shù)。采用放射免疫法檢測雌性大鼠血清甾體激素睪酮（T）、雌二醇（E2）、孕酮（P）以及促性腺激素黃體生成素（LH）水平。取卵巢組織提取mRNA，實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測大鼠卵巢組織中PPARγ、StAR、P450arom、P450scc、3β-HSD、17β-HSDI、17β-HSDII mRNA表達(dá)水平。
　　結(jié)果:
　?。?）各處理組間孕鼠飲水?dāng)z食情況未見異常，體

4、重增量與孕期無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。未見死胎、畸胎。各窩產(chǎn)仔數(shù)以及性別比無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。（2）各處理組間F1代雌性大鼠出生時(shí)體重存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.01)，與對照組相比，10mg/kg、50mg/kg劑量組雌性大鼠出生時(shí)體重降低；各劑量組間兩兩比較，2mg/kg劑量組分別與10mg/kg以及50mg/kg劑量組間有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05)，2mg/kg劑量組雌性大鼠出生時(shí)體重高于10mg/kg以及50mg/kg

5、劑量組。各處理組間F1代雌性大鼠出生時(shí)AGD無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。（3）各處理組間F1代雌性大鼠出生后至哺乳期體重存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.001)；各處理組間F1代雌性大鼠青春期前體重存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05)，與對照組相比，2mg/kg劑量組雌性大鼠體重升高(P<0.05)，50mg/kg劑量組降低(P<0.05)；各處理組間F1代雌性大鼠青春期至性成熟期體重存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05)，與對照組相比，50mg/kg劑量

6、組雌性大鼠體重降低(P<0.05)；各處理組間F1代雌性大鼠性成熟期后體重沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。（4）各處理組間F1代雌性大鼠陰道開口時(shí)間無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。各處理組間F1代雌性大鼠動(dòng)情周期異常率有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異
　　(P<0.05)，與對照組相比，50mg/kg劑量組長期停留在動(dòng)情間期的雌性大鼠數(shù)量增多。（5）各處理組間F1代雌性大鼠子宮、卵巢臟器系數(shù)無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。（6）各處理組間F1代雌性大鼠血

7、清孕酮水平存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05)，與對照組比較，10mg/kg劑量組F1代雌性大鼠血清孕酮水平升高(P<0.05)；各劑量組間比較，10mg/kg劑量組F1代雌性大鼠血清孕酮水平大于2mg/kg劑量組(P<0.05)。各處理組間F1代雌性大鼠血清雌二醇水平無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。各處理組間F1代雌性大鼠血清睪酮水平存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05)，與對照組比較，10mg/kg劑量組F1代雌性大鼠血清睪酮水平升高(P<0.05

8、)；各劑量組間比較，10mg/kg劑量組F1代雌性大鼠血清睪酮水平大于2mg/kg劑量組(P<0.05)。各處理組間F1代雌性大鼠血清促性腺激素黃體生成素水平無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。（7）各處理組間F1代雌性大鼠卵巢組織中PPARγ、StAR、P450arom、P450scc、3β-HSD、17β-HSDI、17β-HSDII mRNA表達(dá)水平無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。
　　結(jié)論:
　?。?）出生前暴露DEHP可干