油菜粒重差異的細胞學基礎及基因表達分析.pdf

1、目前對于甘藍型油菜粒重的研究大多數(shù)集中在QTL定位上，而種子發(fā)育及其遺傳調(diào)控路徑的研究則相對缺乏。本研究利用兩個粒重差異為20％的TSWA7a位點近等基因系，通過石蠟切片、DIC等技術，系統(tǒng)觀察了兩個材料種子形成過程中胚、胚乳以及種皮的發(fā)育，同時對兩材料種子成熟過程中的每角果種子鮮重、每角果長等性狀進行考察，以明確近等基因系間粒重差異發(fā)生的可能時期以及細胞學原因。在此基礎上，對不同時期子房或種子轉(zhuǎn)錄組測序篩選出的差異表達基因進行了相對表

2、達量分析，以為鑒定可能參與油菜粒重的候選基因提供參考。主要結(jié)果如下:
　　1.選取了12個時期對兩材料的胚珠/種子發(fā)育進行了系統(tǒng)觀察。對兩材料5mm長的花蕾中子房內(nèi)胚珠至授粉后3天共4個時期內(nèi)的胚珠面積做了測量統(tǒng)計。結(jié)果顯示大粒材料各個時期的胚珠面積均顯著大于小粒材料，平均差異為20.39％。
　　2.利用石蠟切片技術觀察了兩材料授粉后5天至授粉后35天胚的發(fā)育過程，得到了甘藍型油菜種子發(fā)育過程中胚發(fā)育的系列進程圖。授粉后1

3、4天時油菜種子發(fā)育處于球形胚階段，授粉后21天時胚柄已經(jīng)退化消失;推測甘藍型油菜的胚乳細胞化可能發(fā)生在授粉14天以后。利用DIC技術對兩材料49dap成熟種子中胚外子葉的細胞大小進行了觀察與統(tǒng)計，結(jié)果顯示大粒材料的胚外子葉細胞平均大小是小粒材料的1.05倍，差異顯著，推測兩材料胚的差異可能是由細胞變大引起的。
　　3.對兩材料種皮的發(fā)育過程進行了細胞學觀察，統(tǒng)計了5mm花蕾子房內(nèi)胚珠外珠被的細胞數(shù)目與大小。大粒材料最外層珠被平均細

4、胞數(shù)目是小粒材料的1.25倍，而細胞大小是小粒材料的0.9倍，差異極顯著，表明大粒材料珠被的差異主要由最外層珠被細胞數(shù)目增多造成的。
　　4.對兩材料種子成熟過程中平均每角果種子鮮重、每角果鮮重、每角果皮鮮重以及每角果長的考察顯示，授粉后14天至21天之間，各項生長性狀的數(shù)據(jù)都在快速增加，此階段是角果發(fā)育的重要生長階段。授粉21天后每角果長幾乎停止增長，結(jié)合甘藍型油菜胚的發(fā)育過程，小粒材料的胚在授粉后28天時已經(jīng)基本填充了大部分的