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文檔簡介
1、目前對于甘藍(lán)型油菜粒重的研究大多數(shù)集中在QTL定位上,而種子發(fā)育及其遺傳調(diào)控路徑的研究則相對缺乏。本研究利用兩個(gè)粒重差異為20%的TSWA7a位點(diǎn)近等基因系,通過石蠟切片、DIC等技術(shù),系統(tǒng)觀察了兩個(gè)材料種子形成過程中胚、胚乳以及種皮的發(fā)育,同時(shí)對兩材料種子成熟過程中的每角果種子鮮重、每角果長等性狀進(jìn)行考察,以明確近等基因系間粒重差異發(fā)生的可能時(shí)期以及細(xì)胞學(xué)原因。在此基礎(chǔ)上,對不同時(shí)期子房或種子轉(zhuǎn)錄組測序篩選出的差異表達(dá)基因進(jìn)行了相對表
2、達(dá)量分析,以為鑒定可能參與油菜粒重的候選基因提供參考。主要結(jié)果如下:
1.選取了12個(gè)時(shí)期對兩材料的胚珠/種子發(fā)育進(jìn)行了系統(tǒng)觀察。對兩材料5mm長的花蕾中子房內(nèi)胚珠至授粉后3天共4個(gè)時(shí)期內(nèi)的胚珠面積做了測量統(tǒng)計(jì)。結(jié)果顯示大粒材料各個(gè)時(shí)期的胚珠面積均顯著大于小粒材料,平均差異為20.39%。
2.利用石蠟切片技術(shù)觀察了兩材料授粉后5天至授粉后35天胚的發(fā)育過程,得到了甘藍(lán)型油菜種子發(fā)育過程中胚發(fā)育的系列進(jìn)程圖。授粉后1
3、4天時(shí)油菜種子發(fā)育處于球形胚階段,授粉后21天時(shí)胚柄已經(jīng)退化消失;推測甘藍(lán)型油菜的胚乳細(xì)胞化可能發(fā)生在授粉14天以后。利用DIC技術(shù)對兩材料49dap成熟種子中胚外子葉的細(xì)胞大小進(jìn)行了觀察與統(tǒng)計(jì),結(jié)果顯示大粒材料的胚外子葉細(xì)胞平均大小是小粒材料的1.05倍,差異顯著,推測兩材料胚的差異可能是由細(xì)胞變大引起的。
3.對兩材料種皮的發(fā)育過程進(jìn)行了細(xì)胞學(xué)觀察,統(tǒng)計(jì)了5mm花蕾子房內(nèi)胚珠外珠被的細(xì)胞數(shù)目與大小。大粒材料最外層珠被平均細(xì)
4、胞數(shù)目是小粒材料的1.25倍,而細(xì)胞大小是小粒材料的0.9倍,差異極顯著,表明大粒材料珠被的差異主要由最外層珠被細(xì)胞數(shù)目增多造成的。
4.對兩材料種子成熟過程中平均每角果種子鮮重、每角果鮮重、每角果皮鮮重以及每角果長的考察顯示,授粉后14天至21天之間,各項(xiàng)生長性狀的數(shù)據(jù)都在快速增加,此階段是角果發(fā)育的重要生長階段。授粉21天后每角果長幾乎停止增長,結(jié)合甘藍(lán)型油菜胚的發(fā)育過程,小粒材料的胚在授粉后28天時(shí)已經(jīng)基本填充了大部分的
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