PTEN Ki-67 Bax蛋白與卵巢腫瘤關(guān)系的研究.pdf

1、研究背景：卵巢癌是女性生殖器三大惡性腫瘤之一，與其他惡性腫瘤一樣，它的發(fā)生、發(fā)展也是一個(gè)多步驟、多階段且有序的過程。如今隨著分子生物學(xué)的發(fā)展，對癌基因、抑癌基因及其產(chǎn)物的檢測在腫瘤發(fā)病機(jī)制、惡性程度、轉(zhuǎn)移能力以及病理診斷和估計(jì)預(yù)后等方面顯示了重要作用。PTEN(又稱MMAC1或TEP1)是近年來發(fā)現(xiàn)的新的抑癌基因，定位于染色體10q23上，它與多種腫瘤的發(fā)生、發(fā)展、侵襲、轉(zhuǎn)移有關(guān)，但其在卵巢腫瘤中研究報(bào)道不多，結(jié)果不一，成為近年來卵巢腫

2、瘤研究的熱點(diǎn)之一。Ki-67(細(xì)胞核相關(guān)抗原)是一種重要的反映腫瘤增殖活性的蛋白，對研究腫瘤的生物學(xué)行為、判斷其危害性具有重要意義，而且在許多腫瘤中都有望成為診斷和預(yù)測疾病預(yù)后的輔助工具。Bax是與Bcl-2相關(guān)X蛋白，它可以預(yù)測在接受凋亡刺激后細(xì)胞凋亡的敏感性。1，25二羥維生素D3是近年來研究較多的抗腫瘤藥物，具有抑制細(xì)胞增殖和誘導(dǎo)分化的作用，但其在卵巢癌中的作用研究報(bào)道不多。 目的：(1)研究抑癌基因(PTEN)、細(xì)胞增殖

3、核抗原(Ki-67)及促凋亡基因(Bax)在卵巢漿液性腫瘤組織中的表達(dá)情況及其與卵巢漿液性囊腺癌臨床病理特征的關(guān)系。(2)探討1，25-二羥維生素D3(1，25(OH)2D3)單獨(dú)及其與順鉑合用對人卵巢漿液性囊腺癌細(xì)胞株(HO-8910)生長及凋亡的影響，并測定二者作用下細(xì)胞周期分布、凋亡情況、PTEN、Ki-67、Bax蛋白表達(dá)情況，進(jìn)一步探討它們的作用機(jī)制。 方法：(1)用免疫組織化學(xué)方法測定卵巢漿液性囊腺癌、交界性漿液性囊

4、腺瘤、漿液性囊腺瘤中PTEN、Ki-67及Bax蛋白表達(dá)情況。(2)用細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)及四唑鹽(MTT)比色法測定不同濃度1，25(OH)2D3單獨(dú)及其與順鉑合用對HO-8910細(xì)胞的生長抑制作用。(3)用流式細(xì)胞儀測定、分析1，25(OH)2D3單獨(dú)及其與順鉑合用對該細(xì)胞株細(xì)胞周期及凋亡的影響。(4)用免疫細(xì)胞化學(xué)技術(shù)檢測1，25(OH)2D3單獨(dú)及其順鉑合用后PTEN、Ki-67及Bax蛋白表達(dá)情況。 結(jié)果：(1)PTEN在卵巢

5、漿液性囊腺癌中的表達(dá)顯著低于交界性漿液性囊腺瘤、漿液性囊腺瘤(P＜0.05)，在卵巢漿液性囊腺癌中PTEN的表達(dá)在高中分化組明顯高于低分化組(P＜0.05)；臨床Ⅰ/Ⅱ期組明顯高于Ⅲ/Ⅳ期組(P＜0.05)。而Ki-67在以上各組中的表達(dá)恰好與PTEN相反；且兩者的表達(dá)均與年齡無關(guān)(P＞0.05)，在卵巢漿液性囊腺癌中PTEN與Ki-67的表達(dá)呈負(fù)相關(guān)(P＜0.05)。Bax在卵巢漿液性囊腺癌中的表達(dá)高于交界性囊腺瘤、囊腺瘤，但差異無統(tǒng)

6、計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)，在卵巢漿液性囊腺癌中Bax的表達(dá)與臨床分期、年齡均無關(guān)(P＞0.05)，但其在高中分化組明顯高于低分化組(P＜0.05)。(2)MTT比色法結(jié)果顯示：10-7mol/L，的1，25(OH)2D3能有效抑制HO-8910細(xì)胞的生長(P＜0.01)；1，25(OH)2D3與順鉑合用有協(xié)同抑制作用(P＜0．01)；(3)流式細(xì)胞儀進(jìn)行細(xì)胞周期及凋亡分析顯示：與對照組相比，1，25(OH)2D3、順鉑單獨(dú)作用于該細(xì)胞4

7、8h后G0/G1期細(xì)胞增多，凋亡率增高，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)；二者合用G0/G1期細(xì)胞增多、凋亡率增高更加明顯(P＜0.01)。(4)免疫細(xì)胞化學(xué)染色檢測顯示：單用1，25(OH)2D3、DDP作用該細(xì)胞48h后Ki-67表達(dá)下降，Bax、PTEN表達(dá)增高，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)；二者合用時(shí)Ki-67幾乎不表達(dá)，而Bax、PTEN表達(dá)增高更明顯(P＜0．01)。 結(jié)論：(1)PTEN在卵巢漿液性囊腺癌中

8、表達(dá)降低，與卵巢漿液性囊腺癌的組織學(xué)分級呈正相關(guān)，與臨床病理分期呈負(fù)相關(guān)；Ki-67表達(dá)與PTEN相反；在卵巢漿液性囊腺癌中PTEN與Ki-67的表達(dá)呈負(fù)相關(guān)。Bax的表達(dá)與卵巢漿液性腫瘤的良惡性、臨床分期均無關(guān)；但與組織學(xué)分級呈正相關(guān)。PTEN、Ki-67及Bax蛋白的表達(dá)異?？赡芘c卵巢漿液性囊腺癌的發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)。(2)1，25(OH)2D3和順鉑對人卵巢癌細(xì)胞株HO-8910均有抑制作用，1，25(OH)2D3能增強(qiáng)順鉑的抑制