抵當(dāng)湯對高脂飲食大鼠胰島素抵抗的預(yù)防作用及機(jī)制研究.pdf

1、目的:通過高脂飲食誘導(dǎo)大鼠胰島素抵抗(insulin resistance,IR)模型,觀察抵當(dāng)湯對其主動脈組織中胰島素受體、胰島素樣生長因子-1,血清中胰島素生長因子-1、一氧化氮、內(nèi)皮素的影響,探討抵當(dāng)湯改善胰島素抵抗的部分作用機(jī)制,為臨床應(yīng)用提供理論依據(jù)。
　　 胰島素與胰島素受體(insulin recePtor,InsR)結(jié)合后發(fā)揮作用,如果胰島素受體功能下降或者數(shù)量減少,使胰島素不能發(fā)揮應(yīng)有的作用,便可導(dǎo)致胰島素抵抗

2、發(fā)生。人體的許多組織可以產(chǎn)生和分泌胰島素樣生長因子-1(insulin-like.growth factor1,IGF-1),它具有類似胰島素的作用,可改善胰島素抵抗,同時具有保護(hù)冠狀動脈的作用,而IR是內(nèi)皮功能受損的重要原因之一,可加重冠狀動脈病變。
　　 抵當(dāng)湯出自東漢張仲景的《傷寒雜病論》,由大黃、桃仁、虻蟲、水蛭4味藥組成。該方是治療蓄血實(shí)證的經(jīng)典方劑,具有活血通絡(luò)、逐瘀攻下之功效。本實(shí)驗(yàn)應(yīng)用高脂飼料喂養(yǎng)的方法復(fù)制胰島素

3、抵抗模型,同時給予抵當(dāng)湯灌胃治療,觀察胰島素抵抗大鼠上述各項(xiàng)指標(biāo)的變化,探討抵當(dāng)湯對胰島素抵抗的作用機(jī)制,為抵當(dāng)湯更好的應(yīng)用于臨床提供理論依據(jù)。
　　 方法:
　　 1、選用體重為200g±20g健康清潔級雄性Wistar大鼠35只,適應(yīng)性喂養(yǎng)1周后,隨機(jī)分為5組,每組7只,分為:空白對照組(Ⅰ組),模型組(Ⅱ組),抵當(dāng)湯低劑量組(Ⅲ組),抵當(dāng)湯高劑量組(Ⅳ組),血脂康組(Ⅴ組)。
　　 2、實(shí)驗(yàn)給藥:Ⅰ組喂普通

4、飼料,同時灌胃蒸餾水(10ml/kg.d);Ⅱ組喂高脂飼料,同時灌胃蒸餾水(10ml/kg.d);Ⅲ組喂高脂飼料,同時灌胃抵當(dāng)湯煎劑1g生藥/kg.d;Ⅳ組喂高脂飼料,同時灌胃抵當(dāng)湯煎劑2g生藥/kg.d;Ⅴ組喂高脂飼料,同時灌胃血脂康0.2 g/kg.d。
　　 3、指標(biāo)檢測:喂養(yǎng)8周后,斷頭取血,測定血清FBG、INS、IGF-1、NO、ET,計(jì)算HOMA-IR、ISI;留取胸主動脈,應(yīng)用免疫組織化學(xué)方法,觀察主動脈組織中I

5、nsR、IGF-1變化。
　　 結(jié)果:
　　 1、抵當(dāng)湯對IR大鼠胰島素抵抗指數(shù)、胰島素敏感指數(shù)的影響結(jié)果顯示,模型組與空白對照組相比,大鼠HOMA-IR升高,ISI降低,統(tǒng)計(jì)學(xué)有顯著性差異(P＜0.01或P＜0.05),表明成功復(fù)制高脂飲食IR大鼠模型;抵當(dāng)湯低、高劑量組與模型組相比,大鼠HOMA-IR明顯降低,而ISI明顯升高統(tǒng)計(jì)學(xué)有顯著性差異(P＜0.05或P＜0.01);抵當(dāng)湯低、高劑量組之間相比,低劑量組大鼠H

6、OMA-IR降低,ISI升高,有優(yōu)于高劑量組的趨勢,但無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05);抵當(dāng)湯低、高劑量組與血脂康組相比,亦無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。表明抵當(dāng)湯可改善胰島素抵抗?fàn)顟B(tài),增加胰島素敏感性。
　　 2、抵當(dāng)湯對IR大鼠主動脈組織中胰島素受體(InsR)的影響結(jié)果顯示,InsR陽性表達(dá)呈棕黃色染色,模型組與空白對照組相比,大鼠平滑肌細(xì)胞胞膜及胞漿InsR表達(dá)減弱,計(jì)算兩者平均光度值(average oPtical den

7、sity,AOD),統(tǒng)計(jì)學(xué)有顯著性差異(P＜0.05),表明IR可導(dǎo)致InsR表達(dá)減少;抵當(dāng)湯低、高劑量組與模型組相比,大鼠平滑肌細(xì)胞胞膜及胞漿InsR表達(dá)增強(qiáng),AOD統(tǒng)計(jì)學(xué)有顯著性差異(P＜0.05);抵當(dāng)湯低、高劑量組之間相比,大鼠平滑肌細(xì)胞胞膜及胞漿InsR表達(dá)無明顯差別,AOD統(tǒng)計(jì)學(xué)無顯著性差異(P＞0.05);抵當(dāng)湯低、高劑量組與血脂康組相比,大鼠平滑肌細(xì)胞胞膜及胞漿InsR表達(dá)無明顯差別,AOD統(tǒng)計(jì)學(xué)無顯著性差異(P＞0.0

8、5)。表明抵當(dāng)湯可升高平滑肌細(xì)胞膜及胞漿中InsR表達(dá),這可能是抵當(dāng)湯改善IR的作用機(jī)制之一。
　　 3、抵當(dāng)湯對IR大鼠血清中胰島素樣生長因子1(IGF-1)的影響結(jié)果顯示,模型組與對照組相比,大鼠血清IGF-1含量明顯降低,統(tǒng)計(jì)學(xué)有顯著性差異(P＜0.05),表明機(jī)體發(fā)生IR時,血清中IGF-1降低;抵當(dāng)湯低、高劑量組與模型組相比,大鼠血清IGF-1明顯升高,統(tǒng)計(jì)學(xué)有顯著性差異(P＜0.05);抵當(dāng)湯低、高劑量組之間相比,高

9、劑量組升高趨勢優(yōu)于低劑量組,但統(tǒng)計(jì)學(xué)無顯著性差異(P＞0.05);抵當(dāng)湯低、高劑量組與血脂康組相比,前者升高趨勢優(yōu)于后者,但統(tǒng)計(jì)學(xué)無顯著性差異(P＞0.05)。表明抵當(dāng)湯可升高血清中IGF-1,這可能是其改善IR的機(jī)制之一。
　　 4、抵當(dāng)湯對IR大鼠主動脈組織中胰島素樣生長因子-1(IGF-1)蛋白表達(dá)的影響結(jié)果顯示,IGF-1陽性表達(dá)呈棕黃色染色,模型組與空白對照組相比,大鼠平滑肌細(xì)胞胞膜及胞漿IGF-1蛋白表達(dá)減弱,AOD

10、統(tǒng)計(jì)學(xué)具有顯著性差異(P＜0.05),表明IR可導(dǎo)致平滑肌細(xì)胞中IGF-1表達(dá)減少;抵當(dāng)湯低、高劑量組與模型組相比,大鼠平滑肌細(xì)胞胞膜及胞漿IGF-1表達(dá)明顯深染,AOD統(tǒng)計(jì)學(xué)具有顯著性差異(P＜0.05);抵當(dāng)湯低、高劑量組之間相比,大鼠平滑肌細(xì)胞胞膜及胞漿染色無明顯差別,AOD統(tǒng)計(jì)學(xué)無顯著性差異(P＞0.05);抵當(dāng)湯低、高劑量組與血脂康組相比,大鼠平滑肌細(xì)胞胞膜及胞漿染色無明顯差別,AOD統(tǒng)計(jì)學(xué)無顯著性差異(P＞0.05)。表明抵

11、當(dāng)湯可升高平滑肌細(xì)胞膜及胞漿中IGF-1表達(dá),這可能是抵當(dāng)湯改善IR的作用機(jī)制之一。
　　 5、抵當(dāng)湯對IR大鼠血清ET、NO的影響結(jié)果顯示:模型組與空白對照組相比,大鼠血清ET含量升高,NO含量下降,統(tǒng)計(jì)學(xué)有顯著性差異(P＜0.05或P＜0.01),說明IR可引起大鼠內(nèi)皮損傷;抵當(dāng)湯低、高劑量組與模型組相比,大鼠血清ET含量降低,NO含量升高,統(tǒng)計(jì)學(xué)有顯著性差異(P＜0.05或P＜0.01);抵當(dāng)湯低、高劑量組之間相比及與血脂