復(fù)方貞術(shù)調(diào)脂方對(duì)胰島素抵抗的作用及機(jī)制研究.pdf

1、背景：胰島素抵抗在代謝綜合征(MS)發(fā)展中發(fā)揮著重要的作用。中藥復(fù)方貞術(shù)調(diào)脂方(FTZ)已經(jīng)被用于改善高脂血癥、動(dòng)脈粥樣硬化和其他與代謝紊亂有關(guān)的疾病。
　　目的:觀察復(fù)方貞術(shù)調(diào)脂方(FTZ)對(duì)胰島素抵抗(IR)HepG2細(xì)胞及代謝綜合征（MS）大鼠的作用，并從對(duì)胰島素信號(hào)磷脂酰肌醇-3-激酶(PI-3K)和胰島素受體底物1(IRS1)蛋白表達(dá)的影響，探討其作用機(jī)制，為開拓FTZ的治療范圍，闡明FTZ調(diào)節(jié)糖脂代謝的機(jī)制提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)

2、。
　　方法:高濃度胰島素誘導(dǎo)HepG2細(xì)胞使其產(chǎn)生胰島素抵抗，用高中低三個(gè)劑量的FTZ干預(yù)后，葡萄糖氧化酶法檢測(cè)HepG2細(xì)胞培養(yǎng)液上清液中葡萄糖的含量,實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)HepG2細(xì)胞胰島素信號(hào)PI-3Kp85 mRNA的表達(dá)，Western blot檢測(cè)HepG2細(xì)胞胰島素信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)蛋白IRS-1表達(dá)。在體內(nèi)，將60只雄性SD大鼠，隨機(jī)分成正常大鼠組、MS組、阿司匹林大鼠組(200 mg/kg)、FTZ高(6g/kg)、中

3、(3g/kg)、低(1.5g/kg)劑量組，共6組，每組10只。采用喂養(yǎng)高熱量飼料連續(xù)12周誘導(dǎo)MS大鼠模型。在造模第5周時(shí)，各實(shí)驗(yàn)組開始連續(xù)8周灌胃相應(yīng)藥物（10ml/kg），正常大鼠組和MS組則灌胃給予等量的生理鹽水。實(shí)驗(yàn)過程中定期稱重，給藥結(jié)束后測(cè)定大鼠血清中空腹血糖(FPG)，空腹胰島素(FPI)水平和脂質(zhì)水平，并計(jì)算胰島素抵抗指數(shù)(HOMA-IR)。采用RT-PCR法檢測(cè)MS大鼠脂肪組織給藥前后PI-3Kp85亞基的mRNA表

4、達(dá)水平。
　　結(jié)果:模型細(xì)胞培養(yǎng)基上清液中葡萄糖含量高于正常細(xì)胞(P<0.05)。給予FTZ(1,25,100μg/ml)后,HepG2細(xì)胞培養(yǎng)基上清液中葡萄糖含量均低于模型細(xì)胞葡萄糖含量(P<0.05)。胰島素抵抗細(xì)胞與正常細(xì)胞相比PI-3Kp85 mRNA和IRS1的蛋白表達(dá)顯著降低(P<0.05)。給予FTZ干預(yù)后，與胰島素抵抗細(xì)胞相比PI-3Kp85 mRNA和IRS1的蛋白表達(dá)顯著增加(P<0.05)。此外與模型組相比，

5、FTZ能顯著降低MS大鼠血漿TC、TG、空腹血糖、胰島素濃度及胰島素抵抗指數(shù)(P<0.05或P<0.01)；可顯著升高血中HDL-C水平，上調(diào)大鼠脂肪組織PI-3Kp85 mRNA的表達(dá)(P<0.05或P<0.01)。
　　結(jié)論:FTZ可改善胰島素抵抗HepG2細(xì)胞對(duì)葡萄糖的攝取，調(diào)節(jié)MS大鼠脂質(zhì)水平，減輕體重、降糖、增強(qiáng)胰島素敏感性，對(duì)實(shí)驗(yàn)性MS具有防治作用。FTZ還能夠上調(diào)胰島素信號(hào)PI-3K p85 mRNA和IRS1蛋白質(zhì)