生長調(diào)節(jié)劑調(diào)控四季蜜龍眼夏季成花機理的初步研究.pdf

1、熱帶生態(tài)型龍眼品種四季蜜具有一年多次開花結(jié)果特性，應(yīng)用春季修剪結(jié)合外施生長調(diào)節(jié)劑可調(diào)控四季蜜龍眼夏季集中成花，然而其生理及分子調(diào)控機理的研究較少。為此本試驗首先探討四季蜜龍眼夏季成花調(diào)控過程中可溶性糖、淀粉、可溶性蛋白、游離氨基酸以及異戊烯基腺嘌呤[N6-(2-Isopentenyl)adenosine(IPA)]、吲哚乙酸[Indolylacetic acid(IAA)]、脫落酸[Abscisic acid(ABA)]、赤霉素[Gib

2、rellic acid(GA)]的變化，其次通過同源克隆獲得四季蜜龍眼重要開花基因FLOWERING LOCUST(FT)，并分析其表達模式和功能，以期從生理和分子生物學(xué)水平上初步探明生長調(diào)節(jié)劑調(diào)控四季蜜龍眼夏季成花的機理。本研究將為四季蜜龍眼的花期調(diào)控和產(chǎn)期調(diào)節(jié)提供理論指導(dǎo)。主要研究結(jié)果如下:
　　(1)四季蜜龍眼結(jié)果母枝單元末次梢葉片淺綠色、芽尚未伸長生長時，向葉面噴布126.9 mg/L乙烯利+500 mg/L多效唑混合液，

3、7d后噴布126.9 mg/L乙烯利+250mg多效唑混合液，能促進四季蜜龍眼夏季集中成花，成花株率為100％，成花枝率為98.4％。
　　(2)多效唑和乙烯利處理增加葉片IPA、ABA的含量，降低了葉片中GA的含量。高水平的IPA、低水平的GA以及較高水平的IAA、ABA有助于四季蜜龍眼花芽分化。
　　(3)多效唑和乙烯利處理增加了樹體內(nèi)IPA/IAA的比值，葉片中較高IPA/IAA比值可以抑制樹體的營養(yǎng)生長，有效地促進花

4、芽分化。
　　(4)四季蜜龍眼成花過程中較高含量的碳水化合物有利于成花，葉片中C/N比值高促進花芽分化。
　　(5)本試驗克隆獲得了兩個四季蜜龍眼FT同源基因cDNA全長，分別命名為DlFT1和DlFT2。分析表明DlFT1和DlFT2開放閱讀框(ORF)都為525 bp，各編碼174個氨基酸，兩者所編碼的蛋白質(zhì)存在24個氨基酸殘基的差異。DlFT1和DlFT2同其它物種的FT同源基因高度保守，并且在蛋白質(zhì)空間結(jié)構(gòu)以及結(jié)構(gòu)域

5、上高度相似，推測它們的功能相似。
　　根據(jù)實時熒光定量結(jié)果推測:葉片中DlFT1和DlFT2在PP333和乙烯利誘導(dǎo)四季蜜龍眼成花轉(zhuǎn)變的過程中可能起較大作用，且DlFT2的表達量顯著上升，推測DlFT2與成花緊密相關(guān)。同時成功構(gòu)建了過量表達載體pBI121-DlFT1和pBI121-DlFT2，利用農(nóng)桿菌介導(dǎo)的花粉管導(dǎo)入法轉(zhuǎn)化擬南芥，收獲T0代種子，為今后基因功能驗證以及進一步探明生長調(diào)節(jié)劑調(diào)控四季蜜龍眼夏季成花的分子機制打下了一