蘋果綿蚜的抗藥性監(jiān)測及機理初探.pdf

1、蘋果綿蚜屬同翅目、癭綿蚜科，是蘋果屬果樹的重要害蟲，也是世界檢疫性對象。蘋果綿蚜目前在我國分布廣泛，對蘋果等果業(yè)生產(chǎn)構(gòu)成嚴(yán)重威脅。化學(xué)防治一直以來是控制蘋果綿蚜的重要手段，隨著殺蟲劑的大量使用，不可避免地會引起蘋果綿蚜抗性的產(chǎn)生。然而，目前有關(guān)蘋果綿蚜抗性監(jiān)測的研究鮮有報道。
　　本文通過對三種生測方法進行比較，選擇浸葉法為最適合蘋果綿蚜的室內(nèi)生測方法，并利用此法測定了不同種群對常用藥劑的抗性水平，同時測定比較了解毒代謝酶活力，克

2、隆獲得了吡蟲啉的作用靶標(biāo)——煙堿型乙酰膽堿受體（nAChR）兩個亞基cDNA的全長序列，并分析了不同抗性水平的蘋果綿蚜種群中這兩個基因氨基酸序列的差異，以期為蘋果綿蚜的抗性監(jiān)測與治理提供理論依據(jù)。研究結(jié)果對于指導(dǎo)各地蘋果綿蚜的有效治理，明確其抗性風(fēng)險及抗性機理具有重要的理論和實際意義。
　　1.蘋果綿蚜生測方法比較及抗藥性監(jiān)測
　　為了明確我國蘋果綿蚜的抗性現(xiàn)狀和分布，通過比較確定蘋果綿蚜合適的生測方法并對山東濟南、江蘇豐縣

3、、新疆察布查爾蘋果綿蚜進行抗性監(jiān)測。采用浸葉法、點滴法、藥膜法等生測方法測定山東濟南蘋果綿蚜對毒死蜱、吡蟲啉、高效氯氟氰菊酯三種藥劑的敏感性，并對三種生測方法進行了分析比較。結(jié)果表明三種方法對蘋果綿蚜的室內(nèi)毒力測定結(jié)果一致，均為毒死蜱、高效氯氟氰菊酯、吡蟲啉的毒力依次降低。綜合比較各種方法的優(yōu)缺點，浸葉法由于操作簡單，更貼近農(nóng)田噴藥實際情況且結(jié)果穩(wěn)定被選擇為蘋果綿蚜最適合的生測方法。
　　利用浸葉法于2014-2015年進行抗性測

4、定，以察布查爾2014蘋果綿蚜為相對敏感種群，結(jié)果發(fā)現(xiàn):對于毒死蜱，濟南、察布查爾和豐縣種群分別表現(xiàn)為中等水平抗性、低水平抗性和低敏感性;對于高效氯氟氰菊酯，2015年濟南、豐縣種群均達到高水平抗性，察布查爾種群達到極高水平抗性;對于吡蟲啉，2014年、2015年濟南種群分別產(chǎn)生了63.54和63.70倍的抗性，達到高水平抗性;2015年察布查爾和豐縣種群抗種群都產(chǎn)生了極高水平的抗性。研究結(jié)果表明測試地區(qū)的蘋果綿蚜對三種藥劑產(chǎn)生了不同程

5、度的抗性，尢以對吡蟲啉的抗性最為嚴(yán)重，防治中應(yīng)注意藥劑的合理輪用延緩抗性加劇。
　　2.不同蘋果綿蚜種群解毒代謝酶活力測定
　　為了進一步闡明蘋果綿蚜的抗性生化機理，測定比較了山東濟南、江蘇豐縣、新疆察布查爾和陜西乾縣四個地區(qū)蘋果綿蚜種群的全酯酶活力和谷胱甘肽-S-轉(zhuǎn)移酶活力。結(jié)果表明:濟南、察布查爾和乾縣三個種群的全酯酶活力之間無明顯差異，豐縣種群的活力卻明顯低于三者;對于谷胱甘肽-S-轉(zhuǎn)移酶，豐縣和察布查爾種群的酶活力顯

6、著高于濟南種群。結(jié)合幾個種群的抗性監(jiān)測結(jié)果，推測谷胱甘肽-S-轉(zhuǎn)移酶活力的升高可能是蘋果綿蚜對高效氯氟氰菊酯和吡蟲啉產(chǎn)生抗性的原因之一。
　　3.蘋果綿蚜煙堿型乙酰膽堿受體(nAChR)基因的克隆及點突變分析
　　為了全面揭示蘋果綿蚜對吡蟲啉的抗性機理，利用PCR和RACE技術(shù)克隆蘋果綿蚜nAChR亞基基因，獲得nAChRα2和nAChRα5亞基cDNA的全長序列，分別命名為Elα2和Elα5。Elα2亞基全長共2064 b