鐮形棘豆生物堿成分研究及毒性評(píng)價(jià).pdf

1、鐮形棘豆(Oxytropis falcate Bunge)藏藥中稱為“達(dá)夏”，系豆科(Lgguminosae)棘豆屬(Oxytropis)多年生草本植物。具有廣闊的藥用開發(fā)前景。對(duì)于鐮形棘豆的化學(xué)成分的報(bào)道較多，但對(duì)其毒性的研究則未見報(bào)道。本試驗(yàn)運(yùn)用化學(xué)成分的系統(tǒng)預(yù)試和薄層色譜技術(shù)，初步確定鐮形棘豆中化學(xué)成分種類。通過致突變?cè)囼?yàn)、亞慢性毒性試驗(yàn)及生殖試驗(yàn)來對(duì)鐮形棘豆的毒性進(jìn)行研究和評(píng)價(jià)，以證明鐮形棘豆具有跟瘋草植物一樣的毒性提供有力的論

2、據(jù)，也為鐮形棘豆藥物的開發(fā)提供更加深入的資料。研究獲得以下結(jié)果： 1.鐮形棘豆化學(xué)成分的預(yù)試驗(yàn)及生物堿薄層色譜分析利用系統(tǒng)預(yù)試和專項(xiàng)預(yù)試相結(jié)合對(duì)鐮形棘豆所含的化學(xué)成分進(jìn)行了預(yù)試驗(yàn)，結(jié)果表明鐮形棘豆中含有酚類、鞣質(zhì)、生物堿、黃酮及其苷類、糖、多糖及其苷類、氨基酸及多肽、皂甙、有機(jī)酸、甾體和三萜類物質(zhì)、揮發(fā)油；不含葸醌及其苷類、內(nèi)酯、香豆素及其苷類、強(qiáng)心甙、氰甙及脂肪族硝基化合物。 對(duì)鐮形棘豆生物堿進(jìn)行系統(tǒng)提取，通過選擇適宜

3、的展開系統(tǒng)對(duì)各萃取段生物堿薄層色譜分析，結(jié)果表明，鐮形棘豆中主要是吲哚里西啶類生物堿，且以大極性成分為主，同時(shí)也含有少量的中、小極性生物堿。氯仿部分有6種生物堿，乙酸乙酯部分有11種生物堿，正丁醇部分有5種生物堿。經(jīng)與苦馬豆素標(biāo)準(zhǔn)品對(duì)照，鐮形棘豆各萃取部分均含有苦馬豆素，并從正丁醇部分分離得到28 mg苦馬豆素，提取率0.00187％。 2.鐮形棘豆正丁醇提取物致突變?cè)囼?yàn)選用苦馬豆素含量最高的正丁醇萃取物，配制成800 mg/k

4、g、1 000 mg/kg、2 000 mg/kg、4 000 mg/kg四個(gè)梯度的水溶液，運(yùn)用骨髓微核試驗(yàn)與精子畸形試驗(yàn)進(jìn)行致突變性評(píng)價(jià)，結(jié)果表明，鐮形棘豆正丁醇萃取物引起小鼠骨髓嗜多染紅細(xì)胞的微核率分別為2.625％0、4.625％0、6.50％0和12.75％0；及精子畸形率為1.44％、1.99％、3.40％和3.475％;且存在劑量-效應(yīng)關(guān)系，也就是說低濃度的時(shí)候?qū)C(jī)體是安全的，劑量在2 000 mg/kg以下是安全范圍，不引

5、起微核及精子畸形發(fā)生率的升高；而高濃度時(shí)會(huì)引起突變發(fā)生率的顯著升高，具有致突變性。 3.鐮形棘豆全草亞急性毒性試驗(yàn)通過給小鼠飼喂添加了鐮形棘豆全草的飼料，對(duì)小鼠的臨床癥狀觀察，血液常規(guī)系數(shù)的檢測(cè)，外周血T細(xì)胞及腹腔巨噬細(xì)胞吞噬功能的檢查、內(nèi)臟組織器官的剖檢，研究鐮形棘豆全草對(duì)小鼠的影響。結(jié)果表明，鐮形棘豆全草對(duì)白細(xì)胞數(shù)及血紅蛋白有一定的影響，而對(duì)紅細(xì)胞、淋巴細(xì)胞的影響不顯著。實(shí)驗(yàn)組小鼠的外周血T淋巴細(xì)胞ANAE陽(yáng)性率分別為8.4

6、％、15％和18.5％，與對(duì)照組比較差異顯著(P<0.05)，而對(duì)巨噬細(xì)胞的非特異性吞噬功能的影響則是低含量有促進(jìn)作用；而高含量則有抑制作用，試驗(yàn)組巨噬細(xì)胞吞噬指數(shù)分別為0.86、0.4.7和0.32。鐮形棘豆全草還能使小鼠各種器官細(xì)胞出現(xiàn)空泡變性。 4.鐮形棘豆全草生殖毒性試驗(yàn)鐮形棘豆全草飼料喂養(yǎng)小鼠進(jìn)行三段生殖毒性試驗(yàn)，結(jié)果顯示鐮形棘豆對(duì)懷孕動(dòng)物體增重的有著顯著的影響，草粉含量越高懷孕動(dòng)物體增重的差異越顯著(P<0.05)，引起胚胎