轉(zhuǎn)筋草生物堿成分及抗腫瘤轉(zhuǎn)移活性研究.pdf

1、轉(zhuǎn)筋草(PachysandraterminalisSieb.Zucc)為黃楊科(Buxaceae)板凳果屬(Pachysandra)植物粉蕊黃楊的帶根全草，是湖北省鄂西地區(qū)土家族常用民間藥物，味苦，辛，性溫，具有祛風濕、舒筋活血、通經(jīng)止帶的功效。民間常用來治風濕發(fā)熱、筋骨痛、精神病狂躁不安、閉經(jīng)等癥?，F(xiàn)代藥理學研究表明轉(zhuǎn)筋草具有細胞毒性、抑制胃酸分泌、抗?jié)兒鸵种颇憠A酯酶等活性。轉(zhuǎn)筋草中富含生物堿、甾醇、三萜等化學成分，其主要成分富貴草

2、型甾體生物堿的研究報道較多，全草含有30種以上的孕甾烷類生物堿，除此還含有大量的三萜類和甾醇類。日本學者菊池徹于上世紀六七十年代報道了28個甾體生物堿類化合物以及9個五環(huán)三萜類化合物。
　　 腫瘤轉(zhuǎn)移是導致大多數(shù)惡性腫瘤患者死亡的原因，切斷轉(zhuǎn)移途徑對腫瘤，尤其是晚期腫瘤的治療至關重要。趨化運動是細胞最基本的功能之一，直接參與免疫細胞歸巢、神經(jīng)發(fā)育等生命活動。研究表明，趨化運動在腫瘤轉(zhuǎn)移中起著關鍵的作用，因此，癌細胞運動調(diào)節(jié)相關蛋

3、白可能成為治療癌癥轉(zhuǎn)移的靶點。
　　 腫瘤發(fā)生浸潤和轉(zhuǎn)移的過程中，均存在細胞粘附分子(cellularadhesionmolecule，CAM)及其介導的粘附行為改變。目前已知的粘附分子中，整合素(integrin)是一族細胞表面分子，介導細胞-細胞間、細胞-細胞外基質(zhì)間相互粘附。研究表明整合素與其相應的配體共同參與腫瘤的侵襲與轉(zhuǎn)移。
　　 蛋白激酶C(ProteinKinaseC，PKC)是細胞內(nèi)重要的信號傳導分子。研

4、究發(fā)現(xiàn)，EGF誘導的乳腺癌細胞趨化運動通過PI3K/PDK1/Akt/PKCζ信號通路，AKt2及其下游底物PKCζ在乳腺癌細胞的侵襲和轉(zhuǎn)移中起著重要作用。
　　 本文在發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)筋草乙醇提取物具有很強的抗乳腺癌細胞趨化遷移作用的基礎上，系統(tǒng)開展了轉(zhuǎn)筋草生物有效化學成分研究。以轉(zhuǎn)筋草全草為研究對象，通過乙醇提取、不同溶劑萃取、酸堿法分離，得到不同極性部位及轉(zhuǎn)筋草總生物堿，利用常壓柱色譜、中壓柱色譜、大孔吸附樹脂和凝膠柱色譜色譜分離、

5、制備高效液相色譜純化，從轉(zhuǎn)筋草的乙醇提取物中共分得30個化合物，進一步利用IR、UV、MS、1H-NMR、13C-NMR、1H-1HCOSY、HMBC、HSQC、ROESY等有機波譜技術和化學方法，鑒定了各化合物的結(jié)構(gòu)，其中5個為未見文獻報道的新化合物，分別為3β-(dimethylamino)-pregn-20α-ol-16-one(1)，3β-(dimethylamino)-pregn-16-one-5,17-diene(2),3β

6、-(dimethylamino)-pregn-20α-ol-16-one-5-ene(3),20β-(dimethylamino)-3β-(senecioylamino)-5α-pregn-11α-ol-16-ene(4),20β-(dimethylamino)-3β-(senecioylamino)-5α-pregn-16-ene(5)。
　　 本文進一步對分離鑒定的各化合物進行了抗腫瘤轉(zhuǎn)移活性篩選，發(fā)現(xiàn)具有抗腫瘤轉(zhuǎn)移活性的主