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文檔簡介
1、目前糖尿病的病死率僅次于心腦血管疾病和腫瘤,已成為威脅人類健康與生命的第三大疾病。糖尿病腎病(diabetic nephropathy,DN)是糖尿病全身微血管合并癥,也是糖尿病微血管病變最危險的并發(fā)癥之一。由于DN的腎臟病變?yōu)槁赃M(jìn)行性損害,臨床癥狀出現(xiàn)較晚,一般出現(xiàn)尿蛋白時病程多在10年以上,臨床DN一旦出現(xiàn)持續(xù)性蛋白尿,其腎功能將不可遏制地進(jìn)行下降。因此能夠早期診斷、早期治療以延緩糖尿病腎病的發(fā)展,是目前本病治療的重點。尿微量白蛋
2、白(Microalbuminuria, MAU)是指尿中白蛋白含量超出健康人參考范圍,但不能用常規(guī)的方法檢測出這種微量的變化。MAU是公認(rèn)的糖尿病腎病的早期診斷指標(biāo),MAU含量檢測對糖尿病腎病的早期診斷和早期治療有重要的參考價值和臨床意義。 目前檢測MAU方法常見的有放射免疫法(RIA)、酶聯(lián)免疫法(ELISA)和免疫比濁法。RIA法半衰期短、存在放射性污染。ELISA法雖然檢出限較低(0.15 mg/L),但是檢測時間長,不適
3、合現(xiàn)場測定;免疫比濁法簡便快速,重復(fù)性好,1小時可檢測30份以上樣品,但需用高質(zhì)量的特種蛋白分析儀。膠體硒免疫層析法克服了以上三種方法的缺點,同時又具有快速、靈敏度高、特異性強、穩(wěn)定性好、操作簡便、無需任何儀器設(shè)備、結(jié)果判斷直觀可靠、經(jīng)濟(jì)實用的特點。 本實驗通過動物常規(guī)免疫技術(shù)、細(xì)胞融合技術(shù)、雜交瘤細(xì)胞的選擇性培養(yǎng)和克隆化,最后建立了4株穩(wěn)定分泌抗人MAU單克隆抗體細(xì)胞株:A4、A11、C8、E4。在此基礎(chǔ)上完成了單克隆抗體的制
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