三七的18S rRNA， matK基因序列和HPLC化學(xué)指紋圖譜檢測與分析研究.pdf

1、目前中藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)化多從化學(xué)成分及其含量方面進(jìn)行考察,而作為質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)化的前提和關(guān)鍵的品種標(biāo)準(zhǔn)化則已經(jīng)深入到分子水平進(jìn)行檢測分析,從分子生物學(xué)的角度為中藥物種的地理分布和分化變異判定提供了科學(xué)依據(jù).該研究的目的是基于基因和化學(xué)指紋圖譜檢測兩個方面來分析名貴中藥三七的18S rRNA和matK基因的分子特征和三七的化學(xué)指紋特征.方法:①利用分子生物技術(shù)平臺,對不同產(chǎn)地的三七以及常見偽品進(jìn)行基因組DNA的提取、PCR擴(kuò)增、序列測定,分析三七及其

2、常見偽品的基因序列差異,以及不同產(chǎn)地三七的DNA分子特征.②利用HPLC的化學(xué)分析技術(shù),對不同產(chǎn)地三七和三七不同藥用部位進(jìn)行化學(xué)指紋圖譜分析,明確產(chǎn)地對三七化學(xué)成分的影響,以及三七不同部位的指紋特征.結(jié)論:①不同產(chǎn)地三七的DNA序列沒有出現(xiàn)差異,除其本身的遺傳特征可能具有高度的保守性外,還有可能是長期的栽培過程中,種質(zhì)資源已趨一致所造成的結(jié)果.基因序列標(biāo)記能從分子水平定性分辨三七及其偽品的遺傳背景差異,為中藥品種標(biāo)準(zhǔn)化提供了先進(jìn)可行、穩(wěn)

3、定可靠的分子標(biāo)準(zhǔn),為經(jīng)典中藥材品質(zhì)評價進(jìn)行了有益的方法學(xué)探索.②HPLC指紋圖譜分析可以直觀地為三七的化學(xué)成分定性并定量,不同產(chǎn)地的三七主要峰相似,但峰的數(shù)量有所差異,至于差異峰是否可以代表產(chǎn)地的特征峰,還需收集更多批次的樣品來驗證.而各峰所代表的化學(xué)成分是否具有藥效學(xué)價值,也有待做進(jìn)一步的譜效學(xué)探討.三七不同部位的指紋圖譜尤其是花和葉的指紋特征隨著花和葉的應(yīng)用增多,將有望成為制定三七花、三七葉新藥用資源質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)的依據(jù),而三七不同商品規(guī)