杭白芷飲片HPLC指紋圖譜研究.pdf

1、目的:建立杭白芷飲片的HPLC指紋圖譜,計(jì)算相似度；建立杭白芷飲片中歐前胡素和異歐前胡素的含量測定方法,為杭白芷飲片的質(zhì)量控制和臨床應(yīng)用提供一定的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　 方法:①考察了杭自芷飲片樣品的不同提取方法和HPLC的色譜條件；在確定的最佳提取方法和色譜條件下,以歐前胡素為參照峰,建立其HPLC標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜,進(jìn)行方法學(xué)考察；計(jì)算12個(gè)不同產(chǎn)地杭白芷飲片指紋圖譜的相似度,比較之間的相似性。②采用反相液相色譜法,Ultimate X

2、B-C18(250 min×4.6 mm,5μm)色譜柱,柱溫30℃,乙腈-水(60:40)為流動相,以1.0 mL·min-1的流速于254nm處檢測不同產(chǎn)地杭白芷飲片中歐前胡素和異歐前胡素的峰面積,比較它們之間兩者的含量差異。
　　 結(jié)果:①最佳提取方法為70％乙醇超聲30min；最佳色譜條件為色譜柱:UltimateXB-C18(250min×4.6mm,5μm)；柱溫:30℃；流速:1.0mL·min-1；檢測波長:25

3、4 nm；流動相:水(A)-乙腈(C)梯度洗脫,洗脫時(shí)間70min,起始濃度為95％A-5％C,在50min時(shí)達(dá)到35％A-65％C,最后在70min時(shí)達(dá)到5％A-95％C。用該梯度洗脫方法能夠得到杭白芷飲片的指紋圖譜。對其方法學(xué)考察表明,系統(tǒng)適應(yīng)性試驗(yàn)結(jié)果符合指紋圖譜的技術(shù)要求,杭白芷飲片供試品溶液在24h內(nèi)基本穩(wěn)定,指紋圖譜重現(xiàn)性好,杭白芷飲片指紋圖譜能夠反映不同產(chǎn)地杭白芷飲片之間的相似性,指紋圖譜相似度均大于0.9。②歐前胡素線性

4、回歸方程為:Y=5.53×103X+27.31(r=0.9995),異歐前胡素線性回歸方程為:Y=4.68×103X+19.62(r=0.9995),分別在進(jìn)樣量為0.0552～0.276μg和0.0480～0.240μg范圍內(nèi)線性關(guān)系良好,平均回收率為98.4％和96.6％。不同產(chǎn)地杭白芷飲片中歐前胡素和異歐前胡素的含量分別在0.046％～0.145％和0.025～,0.087％之間,存在一定的差異。
　　 結(jié)論:①篩選出的最