牡丹組培快繁技術的研究.pdf

1、牡丹觀賞價值高的品種，雄蕊、雌蕊大都高度瓣化，導致種子發(fā)育不全或無結實力，而傳統(tǒng)分株、嫁接繁殖方法，繁殖系數(shù)低且周期長。采用組培技術可在短時間內獲得大量試管苗，既為牡丹新品種培育和定向改良提供遺傳轉化再生體系，又為牡丹種苗商品化提供技術支持和理論依據。
　　本研究以黃色系牡丹中的中晚期品種金閣和海黃為研究對象，以主莖基部鱗芽為外植體，研究了不同取材時期對牡丹試管苗生長的影響，篩選出了外植體最佳取材時期；探討了不同種類和濃度的生長調

2、節(jié)物質對牡丹試管苗增殖及生根的影響，并得出了最適宜其增殖和生根的激素配比；分析了在增殖培養(yǎng)過程中AgNO3對其增殖和褐化的影響，測定了引起褐化的相關生理生化指標。主要研究結果如下：
　?。?）以金閣和海黃的鱗芽為外植體，從2013年10月到2014年4月，每月20日取樣。將鱗芽接種在MS培養(yǎng)基附加0.6 mg/L6-BA和0.2 mg/L NAA中培養(yǎng)，觀察取材時間對牡丹金閣和海黃組培污染率和褐化率以及苗體生長的影響。結果表明：從

3、10月份到翌年4月份均可用牡丹鱗芽進行組培快繁，以3-4月的外植體生長最好，冬前10到11月的牡丹鱗芽需要進行適當?shù)牡蜏嘏c黑暗誘導，以便解除牡丹鱗芽的休眠狀態(tài)。每年3-4月份是牡丹組織培養(yǎng)的鱗芽外植體最佳取材時期。
　　（2）對比金閣和海黃增殖培養(yǎng)的單因素試驗和正交試驗結果可以看出，單獨使用一種激素對牡丹的增殖有一定作用，激素復配可使兩個品種的增殖系數(shù)均大于單獨使用。牡丹金閣最佳增殖培養(yǎng)基組合為MS+6-BA0.6 mg/L+ N

4、AA0.2 mg/L+ KT0.9 mg/L+ TDZ0.06 mg/L，牡丹海黃最佳增殖培養(yǎng)基組合為：MS+6-BA0.9 mg/L+NAA0.3 mg/L+KT0.9 mg/L+TDZ0.04 mg/L。其對金閣增殖影響 TDZ＞KT＞6-BA＞NAA，而對海黃增殖影響6-BA＞KT＞TDZ＞NAA。
　?。?）培養(yǎng)基附加不同濃度 AgNO3，顯著抑制金閣和海黃試管苗的褐變。在增殖培養(yǎng)基中附加1 mg/L和2-3 mg/L的

5、AgNO3能有效抑制金閣和海黃試管苗的褐變，也抑制了其增殖。隨著 AgNO3濃度的增加，金閣和海黃試管苗褐化度呈現(xiàn)先下降后升高趨勢且與SOD、POD和CAT活性呈顯著負相關關系，與試管苗 MDA含量、乙烯釋放速率、PPO活性、O2·-產生速率和多酚含量呈顯著正相關關系。但將在不同 AgNO3濃度處理20 d后的金閣和海黃試管苗轉接到不含 AgNO3的最適增殖培養(yǎng)基上繼續(xù)培養(yǎng)，不僅能有效抑制試管苗的褐化還能促進其增殖，其中1 mg/L A