非酒精性脂肪性肝病大鼠肝細(xì)胞凋亡及核因子-κB的活化.pdf

1、肝細(xì)胞凋亡被認(rèn)為是肝中毒損傷的一種重要機(jī)制，并且可能與肝纖維化發(fā)生及進(jìn)展到肝硬化有關(guān)。因而，抑制凋亡對(duì)人類肝疾病是一個(gè)可能的治療策略。業(yè)已表明，凋亡是酒精導(dǎo)致肝損傷的主要表現(xiàn)方式，最近在非酒精性脂肪性肝炎(nonalcoholicsteatohepatitis，NASH)及酒精性脂肪性肝炎(alcoholicsteatohepatitis，ASH)的研究中已有相關(guān)報(bào)道。但是，只有少數(shù)報(bào)道探討了凋亡與疾病嚴(yán)重程度的關(guān)系以及在人類脂肪變性中

2、的可能機(jī)制。核因子-κB(nuclearfactorkappaB，NF-κB)是一種多向性轉(zhuǎn)錄因子，參與調(diào)控多種前炎癥因子和免疫應(yīng)答基因，可導(dǎo)致前炎癥及化學(xué)因子的過度表達(dá)，與壞死和炎癥相關(guān)。肝細(xì)胞凋亡、核因子-κB活化可能在脂肪肝的發(fā)生、發(fā)展中起一定的作用。 目的：探討肝細(xì)胞凋亡及核因子-κB活化在非酒精性脂肪性肝病大鼠模型中的表達(dá)及其意義，為臨床的治療提供理論依據(jù)。 方法：40只雄性SD大鼠隨機(jī)分為2組，其中造模組30

3、只，給予88％基礎(chǔ)飼料+10％豬油+2％膽固醇；正常對(duì)照組10只，給予基礎(chǔ)飼料，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物均自由飲水進(jìn)食。對(duì)照組10只大鼠于8周后處死，造模組分別于8、12、16周各處死10只，取肝組織標(biāo)本，行蘇木精-伊紅染色(Hematoxylinandeosinstain，HE)觀察肝組織光鏡下的病理改變，苦味酸(VanGieson，VG)染色觀察肝臟纖維化程度。用TUNEL法檢測(cè)肝細(xì)胞凋亡，并以免疫組化檢測(cè)NF-κBp65表示核因子-κB的活化。

4、 結(jié)果：40只大鼠全部進(jìn)入結(jié)果分析。1、肝組織病理學(xué)：造模組8、12、16周動(dòng)物肝組織出現(xiàn)中～重度肝細(xì)胞脂肪變性，以中央靜脈周圍最為明顯，隨造模時(shí)間延長(zhǎng)脂肪變程度逐漸加重，均高于對(duì)照組(P＜0.05)；造模組大鼠肝臟可見程度不等的小葉內(nèi)炎癥、匯管區(qū)炎癥，并有匯管區(qū)變性及點(diǎn)狀或灶狀壞死，甚至部分壞死融合成片，三個(gè)造模組肝臟的炎癥活動(dòng)度評(píng)分均高于對(duì)照組(P＜0.01)。VG染色顯示，造模8～12周大鼠未見肝組織纖維化，但造模16周3/

5、10只大鼠出現(xiàn)少數(shù)肝細(xì)胞竇周纖維化(P＜0.05)。2、肝細(xì)胞凋亡：正常肝組織中TUNEL染色陽(yáng)性肝細(xì)胞較少見，且多散在分布于中央靜脈周圍。造模組可見不同程度的TUNEL染色陽(yáng)性肝細(xì)胞，發(fā)生凋亡的肝細(xì)胞常位于脂肪變嚴(yán)重以及炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)區(qū)域附近。12周、16周造模組大鼠肝組織凋亡細(xì)胞數(shù)明顯高于對(duì)照組(P＜0.01)。3、核因子-κBp65表達(dá)：在正常組中，大鼠在少量肝小葉中央靜脈周圍肝細(xì)胞胞質(zhì)/胞核可見NF-κBp65的表達(dá)，以胞質(zhì)表達(dá)為

6、主。造模組可見程度不等的NF-κBp65陽(yáng)性細(xì)胞胞質(zhì)/胞核表達(dá)，以胞核表達(dá)為主。12周及16周造模組NF-κBp65陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)均明顯高于8周對(duì)照組(P＜0.05)。4、相關(guān)性：核因子-κBp65與肝組織炎癥、脂肪變及纖維化呈顯著正相關(guān)(分別為r=0.8491，P＜0.01；r=0.6703，P＜0.01；r=0.4237，P＜0.05)，肝細(xì)胞凋亡程度與炎癥、脂肪變亦呈顯著正相關(guān)(r=0.6286，P＜0.01；r=0.5936，P＜0