流式細(xì)胞術(shù)檢測VEGF、p-selectin和VCAM-1等炎癥性標(biāo)志物的方法學(xué)性能評價及在心血管疾病診斷中的應(yīng)用.pdf

1、目的:對流式細(xì)胞術(shù)(FCM)檢測血漿血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)、P選擇素(P-selectin)和血管細(xì)胞粘附分子-1（VCAM-1）等炎癥性標(biāo)志物進(jìn)行方法學(xué)性能評價，并觀察三種標(biāo)志物在心血管疾病診斷中的應(yīng)用。
　　方法:參考美國臨床和實驗室標(biāo)準(zhǔn)化協(xié)會(CLSI)[1]系列文件和相關(guān)文獻(xiàn)，結(jié)合工作實際，設(shè)計驗證方案，對BD Arria流式細(xì)胞儀檢測系統(tǒng)測定血漿VEGF、P-selectin和VCAM-1的精密度、準(zhǔn)確度、分析靈敏

2、度、分析測量范圍、回收率和生物可參考區(qū)間6大分析性能進(jìn)行驗證和評價，并將實驗結(jié)果與廠家（美國BD公司）提供的分析指標(biāo)或公認(rèn)的質(zhì)量指標(biāo)進(jìn)行比較。同時，對患有冠心病的患者標(biāo)本進(jìn)行濃度檢測，觀察濃度范圍與患病程度的關(guān)系和相關(guān)性。
　　結(jié)果:VEGF含量在9.77、625.00 ng/L時，批內(nèi)變異系數(shù)分別為4.70％和4.32％，批間變異系數(shù)分別為4.87％和6.76％;P-selectin含量在39.06和10000.00 ng/L時

3、，批內(nèi)變異系數(shù)分別為4.23％和9.00％，批間變異系數(shù)分別為4.63％和11.00％; VCAM-1含量在39.06和10000.00 ng/L時，批內(nèi)變異系數(shù)分別為4.28％和7.97％，批間變異系數(shù)分別為4.76％和10.32％。VEGF在9.77和625.00ng/L的兩個濃度時的相對偏倚分別為2.10％和3.58％，P-selectin在39.06和10000.00 ng/L時兩個濃度的相對偏倚分別為2.71％和5.28％，V

4、CAM-1在39.06和10000.00 ng/L兩個濃度的相對偏倚分別為4.72％和6.52％。VEGF的檢測靈敏度為12.62 ng/L，P-selectin的檢測靈敏度為15.78 ng/L， VCAM-1的檢測靈敏度為11.67ng/L。VEGF的分析測量范圍為12.62～2190.00ng/L，P-selectin的分析測量范圍為15.78～103928.00 ng/L，VCAM-1的分析測量范圍為11.67～762590.0

5、0ng/L。生物參考區(qū)間驗證結(jié)果:VEGF為59.30ng/L～96.80 ng/L，P-selectin為4512.20ng/L～10250.00ng/L，VCAM-1為4765.00ng/L～15725.00ng/L。VEGF在正常人、穩(wěn)定型心絞痛、不穩(wěn)定型心絞痛、心肌梗死范圍時的濃度范圍分別是78.10±18.70ng/L、365.40±76.10 ng/L、828.30±119.40 ng/L和1639.50±299.00 ng

6、/L;P-selectin在正常人、穩(wěn)定型心絞痛、不穩(wěn)定型心絞痛、心肌梗死范圍時的濃度范圍分別是4512.20±2848.60 ng/L、54020.10±3390.10 ng/L、70979.80±2818.60 ng/L和83189.80±7226.30 ng/L; VCAM-1在正常人、穩(wěn)定型心絞痛、不穩(wěn)定型心絞痛、心肌梗死范圍時的濃度范圍分別是10448.10±3368.40 ng/L、524490.60±37324.50 ng

7、/L、624929.00±30195.70 ng/L和715688.60±24844.40 ng/L。
　　結(jié)論:BD Aria流式細(xì)胞儀檢測系統(tǒng)檢測血漿VEGF、P-selectin和VCAM-1的分析性能符合廠家提供的性能指標(biāo)和公認(rèn)的質(zhì)量指標(biāo)，本研究對建立一個完整的流式細(xì)胞術(shù)質(zhì)量保證體系具有重要意義。通過流式細(xì)胞術(shù)檢測血漿VEGF、P-selectin和VCAM-1的濃度值，在對照組、穩(wěn)定型心絞痛、不穩(wěn)定型心絞痛和心肌梗死有明