五味子活性成分分離純化研究.pdf

1、本研究對(duì)五味子木脂素、五味子多糖和五味子紅色素的提取純化進(jìn)行了綜合分析,確定出適合工業(yè)化生產(chǎn)的工藝流程。五味子粉末可先經(jīng)由熱水法提取多糖和色素后乙醇回流法提取五味子木脂素,而后各活性組分分別采用大孔樹(shù)脂進(jìn)行分離純化。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,這樣的實(shí)驗(yàn)流程不僅可有效分離色素,提高木脂素成品成色,而且所得木脂素水溶液均一性好,易于大孔樹(shù)脂吸附解吸,且不易造成堵塞?？傮w實(shí)驗(yàn)流程步驟簡(jiǎn)便緊湊。具體實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下:
　　在乳化劑輔助乙醇回流提取五味子木

2、脂素實(shí)驗(yàn)中,通過(guò)單因素實(shí)驗(yàn),得到最優(yōu)提取條件:溶劑為乙醇:水:EM(80:20:3,v/v/v)混合液,提取2次,提取時(shí)間2h,固液比10:1(v/w),最佳提取量10.71±0.40mg/g五味子,提取率96％。提取液濃縮至干,加水溶解分散,然后分別加石油醚、正己烷、乙酸乙酯和正丁醇進(jìn)行萃取比較。結(jié)果表明,最佳萃取劑為乙酸乙酯,液液比1:2(v/v),萃取時(shí)間20 min。對(duì)提取多糖色素后的五味子殘?jiān)捎煤幸宜嵋阴サ娜榛瘎┹o助乙醇回

3、流提取法提取木脂素,正交實(shí)驗(yàn)得到最佳提取條件:提取劑為乙醇:水:乙酸乙酯:EM(80:20:10:2,v/v/v/v)混合,提取2次,提取時(shí)間2h,固液比10:1(v/w),得到最高提取量為11.32mg/g五味子。
　　采用AB-8、X-5、SP-207和XAD-4大孔樹(shù)脂純化五味子木脂素。通過(guò)靜態(tài)吸附解吸和穿透實(shí)驗(yàn),篩選出SP-207用于五味子木脂素的純化。采用兩種洗脫方法,連續(xù)梯度洗脫和逐次梯度洗脫,得到SP-207樹(shù)脂純化

4、條件:吸附流速1BV/h,吸附體積3.5BV,洗脫流速2BV/h,采用40%、50%、70%和80%的甲醇水溶液分別洗脫五味子醇甲、醇乙、酯甲和甲素,洗脫體積分別為20、5、5、5BV。
　　采用硅膠柱層析法純化五味子木脂素。用薄層層析法篩選展開(kāi)劑,結(jié)果表明石油醚:乙酸乙酯(5:5,v/v)為展開(kāi)劑分離五味子木脂素,可得到互相分離且清晰的組分斑點(diǎn)。采用硅膠柱層析分離五味子木脂素,混合比例為10:1和5:1(v/v)的石油醚:乙酸乙

5、酯洗脫體系能分離得到五味子醇甲、醇乙和酯甲。
　　采用熱水提取、乙醇沉淀、sevag去蛋白得到五味子粗多糖,并采用離子交換柱進(jìn)一步純化,發(fā)現(xiàn)五味子多糖由中性和酸性多糖組成,酸性多糖占主要成分,約占總量的1/3。分離出的中性和酸性多糖采用凝膠柱層析法進(jìn)一步分級(jí)分離表明:中性多糖和酸性多糖是由2至3種不同分子量的多糖組成。
　　研究五味子紅色素的光譜特性,發(fā)現(xiàn)五味子紅色素隨酸堿度的調(diào)節(jié),顏色有明顯變化,并在220~280nm和4