油菜黑脛病抗性鑒定及防治研究.pdf

1、油菜黑脛病(Phoma stem canker)，是目前世界上最重要的油菜真菌病害之一，該病害寄主范圍廣，生態(tài)適應(yīng)性強，可以在多種氣候條件，栽培措施和作物類型上爆發(fā)、流行，給油菜生產(chǎn)造成極大的經(jīng)濟損失。目前，該病害已成為限制歐洲、加拿大、澳大利亞等地油菜產(chǎn)業(yè)發(fā)展的重要因素，也嚴重威脅著我國的油菜及十字花科作物生產(chǎn)。
　　近年來，盡管油菜黑脛病Leptosphaeria biglobosa在我國的發(fā)生危害呈迅速蔓延趨勢，但因弱侵染型

2、病原菌Leptosphaeria biglobosa未造成明顯的產(chǎn)量損失，以致我國的廣大種植者及科研工作者對該病害仍缺乏科學的認識和全面的了解，對其研究較少，未引起足夠的重視。而從該病害在世界各國的擴散趨勢及演化規(guī)律來看，強侵染型病原菌Leptosphaeria maculans有逐漸侵入并取代弱侵染型病原菌Leptosphaeria biglobosa的趨勢。強侵染型病原菌Leptosphaeriamaculans危害重，造成的產(chǎn)量損

3、失大，對我國的油菜及十字花科作物生產(chǎn)構(gòu)成了威脅。因此，為了研究油菜黑脛病在我國的發(fā)生發(fā)展規(guī)律、我國部分主栽品種的抗性水平及篩選黑脛病的防治藥劑，本文開展了如下工作:
　　采用子葉穿刺接種法，首先在人工氣候條件下研究了黑脛病的侵染條件，構(gòu)建了穩(wěn)定的發(fā)病體系，在此基礎(chǔ)上對我國的35個主栽品種進行接種鑒定，篩選、評價了這些主栽品種對黑脛病的抗性水平并進行了抗病基因推導，同時研究了不同抗性品種接種前后防御酶活性的變化規(guī)律。其次，創(chuàng)建了快速

4、、有效檢測油菜種子攜帶黑脛病菌的DNA提取及檢測方法，同時比較分析了7種防治藥劑的抑菌效果。結(jié)果表明:
　　1.黑脛病病原菌在油菜子葉期的最適侵染、發(fā)病條件為:21-24℃，保濕48h以上。
　　2.在我國的35個油菜主栽品種中沒有發(fā)現(xiàn)對強、弱兩種致病菌表現(xiàn)高抗或免疫的品種，僅1個品種對病原菌Leptosphaeria maculans表現(xiàn)中抗，5個品種表現(xiàn)低抗;16個品種對病原菌Leptosphaeriabiglobosa

5、表現(xiàn)低抗;3個品種兼抗Leptosphaeria maculans和Leptosphaeria biglobosa。
　　3.依據(jù)基因推導法推導，在供試的35個品種中，12個已知的抗病基因Rlm1-9、Lep R1-R3，多數(shù)以基因組合形式分布于30個品種中，這些主栽品種可能含有已知的或新的抗病基因，說明現(xiàn)有的油菜種質(zhì)資源中可能蘊藏著對改良黑脛病抗性具有潛在應(yīng)用價值的基因資源。
　　4.黑脛病菌可以誘導油菜體內(nèi)5種防御酶活性

6、發(fā)生變化，接種后抗病品種的酶活性均迅速升高而達到峰值，且其酶活性增加量顯著大于感病品種;而感病品種的防御酶活性或增幅較小或較抗病品種滯后。這些酶活性峰值出現(xiàn)的高低與早晚，可作為早期鑒定油菜抗黑脛病的生理指標。
　　5.建立了油菜種子攜帶黑脛病菌的DNA提取及檢測方法，CTAB+ Kit先大量再微量提取的DNA適于油菜籽攜帶黑脛病菌的檢測。該方法保證了帶菌量較低時，所提取的總DNA中黑脛病病原菌微量DNA的存在，且其含量可滿足進一步

7、PCR檢測的要求。PCR擴增可有效檢出1000粒或10000粒種子中1粒種子所攜帶的黑脛病菌。其檢出的準確度和靈敏性均高于歐洲所要求的檢測標準5‰。，在油菜籽攜帶黑脛病菌的檢測上取得了突破性進展。
　　6.供試的7種殺菌劑在試驗濃度下對黑脛病菌菌絲的生長均有不同程度的抑制作用，所有藥劑的抑制作用均隨各藥劑濃度的增加而增強，相對抑制率與藥劑濃度呈正相關(guān)。氟硅唑、戊唑醇、咪鮮胺三種殺菌劑對油菜黑脛病有良好的抑制效果，抑制中濃度均小于1