油菜黑脛病抗性鑒定及防治研究.pdf

1、油菜黑脛病(Phoma stem canker)，是目前世界上最重要的油菜真菌病害之一，該病害寄主范圍廣，生態(tài)適應(yīng)性強(qiáng)，可以在多種氣候條件，栽培措施和作物類(lèi)型上爆發(fā)、流行，給油菜生產(chǎn)造成極大的經(jīng)濟(jì)損失。目前，該病害已成為限制歐洲、加拿大、澳大利亞等地油菜產(chǎn)業(yè)發(fā)展的重要因素，也嚴(yán)重威脅著我國(guó)的油菜及十字花科作物生產(chǎn)。
　　近年來(lái)，盡管油菜黑脛病Leptosphaeria biglobosa在我國(guó)的發(fā)生危害呈迅速蔓延趨勢(shì)，但因弱侵染型

2、病原菌Leptosphaeria biglobosa未造成明顯的產(chǎn)量損失，以致我國(guó)的廣大種植者及科研工作者對(duì)該病害仍缺乏科學(xué)的認(rèn)識(shí)和全面的了解，對(duì)其研究較少，未引起足夠的重視。而從該病害在世界各國(guó)的擴(kuò)散趨勢(shì)及演化規(guī)律來(lái)看，強(qiáng)侵染型病原菌Leptosphaeria maculans有逐漸侵入并取代弱侵染型病原菌Leptosphaeria biglobosa的趨勢(shì)。強(qiáng)侵染型病原菌Leptosphaeriamaculans危害重，造成的產(chǎn)量損

3、失大，對(duì)我國(guó)的油菜及十字花科作物生產(chǎn)構(gòu)成了威脅。因此，為了研究油菜黑脛病在我國(guó)的發(fā)生發(fā)展規(guī)律、我國(guó)部分主栽品種的抗性水平及篩選黑脛病的防治藥劑，本文開(kāi)展了如下工作:
　　采用子葉穿刺接種法，首先在人工氣候條件下研究了黑脛病的侵染條件，構(gòu)建了穩(wěn)定的發(fā)病體系，在此基礎(chǔ)上對(duì)我國(guó)的35個(gè)主栽品種進(jìn)行接種鑒定，篩選、評(píng)價(jià)了這些主栽品種對(duì)黑脛病的抗性水平并進(jìn)行了抗病基因推導(dǎo)，同時(shí)研究了不同抗性品種接種前后防御酶活性的變化規(guī)律。其次，創(chuàng)建了快速

4、、有效檢測(cè)油菜種子攜帶黑脛病菌的DNA提取及檢測(cè)方法，同時(shí)比較分析了7種防治藥劑的抑菌效果。結(jié)果表明:
　　1.黑脛病病原菌在油菜子葉期的最適侵染、發(fā)病條件為:21-24℃，保濕48h以上。
　　2.在我國(guó)的35個(gè)油菜主栽品種中沒(méi)有發(fā)現(xiàn)對(duì)強(qiáng)、弱兩種致病菌表現(xiàn)高抗或免疫的品種，僅1個(gè)品種對(duì)病原菌Leptosphaeria maculans表現(xiàn)中抗，5個(gè)品種表現(xiàn)低抗;16個(gè)品種對(duì)病原菌Leptosphaeriabiglobosa

5、表現(xiàn)低抗;3個(gè)品種兼抗Leptosphaeria maculans和Leptosphaeria biglobosa。
　　3.依據(jù)基因推導(dǎo)法推導(dǎo)，在供試的35個(gè)品種中，12個(gè)已知的抗病基因Rlm1-9、Lep R1-R3，多數(shù)以基因組合形式分布于30個(gè)品種中，這些主栽品種可能含有已知的或新的抗病基因，說(shuō)明現(xiàn)有的油菜種質(zhì)資源中可能蘊(yùn)藏著對(duì)改良黑脛病抗性具有潛在應(yīng)用價(jià)值的基因資源。
　　4.黑脛病菌可以誘導(dǎo)油菜體內(nèi)5種防御酶活性

6、發(fā)生變化，接種后抗病品種的酶活性均迅速升高而達(dá)到峰值，且其酶活性增加量顯著大于感病品種;而感病品種的防御酶活性或增幅較小或較抗病品種滯后。這些酶活性峰值出現(xiàn)的高低與早晚，可作為早期鑒定油菜抗黑脛病的生理指標(biāo)。
　　5.建立了油菜種子攜帶黑脛病菌的DNA提取及檢測(cè)方法，CTAB+ Kit先大量再微量提取的DNA適于油菜籽攜帶黑脛病菌的檢測(cè)。該方法保證了帶菌量較低時(shí)，所提取的總DNA中黑脛病病原菌微量DNA的存在，且其含量可滿(mǎn)足進(jìn)一步

7、PCR檢測(cè)的要求。PCR擴(kuò)增可有效檢出1000?；?0000粒種子中1粒種子所攜帶的黑脛病菌。其檢出的準(zhǔn)確度和靈敏性均高于歐洲所要求的檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)5‰。，在油菜籽攜帶黑脛病菌的檢測(cè)上取得了突破性進(jìn)展。
　　6.供試的7種殺菌劑在試驗(yàn)濃度下對(duì)黑脛病菌菌絲的生長(zhǎng)均有不同程度的抑制作用，所有藥劑的抑制作用均隨各藥劑濃度的增加而增強(qiáng)，相對(duì)抑制率與藥劑濃度呈正相關(guān)。氟硅唑、戊唑醇、咪鮮胺三種殺菌劑對(duì)油菜黑脛病有良好的抑制效果，抑制中濃度均小于1