納米粒子界面上的聚合酶鏈反應(yīng)及納米粒子聚集體的制備.pdf

1、聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)是一種體外特定核酸序列擴(kuò)增技術(shù)，是分子生物學(xué)的重要實(shí)驗(yàn)方法之一?，F(xiàn)已廣泛用于生命科學(xué)、遺傳學(xué)和醫(yī)學(xué)等領(lǐng)域等許多領(lǐng)域。DNA分子可以引入功能性基團(tuán)連接在納米粒子表面上，同時(shí)本身可通過(guò)PCR進(jìn)行大規(guī)模增殖。如果在納米粒子界面上能夠順利進(jìn)行PCR并且應(yīng)用于納米材料的組裝，在功能材料學(xué)，生物學(xué)等方面均具有重要意義。本文系統(tǒng)研究了納米粒子界面上的聚合酶鏈反應(yīng)及其納米粒子聚集體的制備，并取得了以下幾個(gè)有意義的結(jié)果： 1

2、.研究了基于納米粒子界面上的PCR制備納米粒子聚集體。將引物連接在不同的納米粒子界面上，以質(zhì)粒pBluescript SK為模板，在納米粒子界面上進(jìn)行PCR。利用原子力顯微鏡(AFM)和熒光光譜儀對(duì)PCR產(chǎn)物分別檢測(cè)。研究了PCR循環(huán)次數(shù)、納米粒子大小、擴(kuò)增DNA片斷長(zhǎng)短對(duì)制備納米粒子聚集體的影響。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：通過(guò)納米粒子界面上的PCR能夠制得以DNA為模板的納米粒子聚集體?？刂芇CR循環(huán)次數(shù)、納米粒子大小、擴(kuò)增DNA片斷長(zhǎng)短可以制備

3、不同形狀和大小的納米粒子聚集體，而且這種聚集體在高溫時(shí)能分散，低溫時(shí)能復(fù)合。因此引物連接在納米粒子表面PCR，可制得具有可逆分散和聚集功能的納米粒子聚集體。 2.研究了啞鈴狀納米粒子聚集體的制備。首先制備粒度均一、分散性良好、不同粒徑的球形金納米粒子，通過(guò)Au-S鍵將5’端修飾-SH-(CH2)6-的引物連接在金納米粒子的界面上，進(jìn)行PCR。利用AFM對(duì)制得的納米粒子聚集體進(jìn)行檢測(cè)，研究了控制納米粒子聚集體形成啞鈴狀的制備條件。

4、實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明在優(yōu)化PCR的條件下，將兩種引物分別連接在金納米粒子表面，均能順利進(jìn)行PCR并制得了以DNA為模板啞鈴狀納米粒子聚集體。通過(guò)控制PCR循環(huán)次數(shù)，納米粒子大小及DNA擴(kuò)增片斷的長(zhǎng)短，能夠有效地控制納米粒子聚集體的大小。 3.研究了基于樹(shù)枝狀化合物(PAMAM)界面上的PCR及聚集體的制備。將引物通過(guò)靜電作用連接到PAMAM分子的表面，采用質(zhì)粒pBluescript SK作為模板，進(jìn)行PCR。并用瓊脂糖凝膠電泳和透射電子