中藥色譜指紋圖譜研究及化學(xué)計量學(xué)方法的應(yīng)用.pdf

1、當(dāng)前的中藥現(xiàn)代化是在信息化時代，科學(xué)技術(shù)高度發(fā)展，人們重新崇尚回歸自然及我國對外開放，面向全球的大環(huán)境下的又一次新的浪潮。盡管中藥所含物質(zhì)群非常復(fù)雜，但聯(lián)用儀器和相關(guān)化學(xué)計量學(xué)方法的快速發(fā)展為中藥這一復(fù)雜體系的分析與質(zhì)量控制提供了強(qiáng)有力的手段和廣闊的前景。近年來，指紋圖譜技術(shù)在國際上已廣泛達(dá)成共識，色譜指紋圖譜質(zhì)量控制是中藥質(zhì)量控制領(lǐng)域的熱點和趨勢。本論文以實際中藥體系為研究對象，利用HPLC-DAD和GC-MS聯(lián)用技術(shù)，結(jié)合相關(guān)化學(xué)計

2、量學(xué)方法，進(jìn)行中藥色譜指紋圖譜研究，為中藥質(zhì)量控制及藥理、藥效研究提供基礎(chǔ)數(shù)據(jù)和理論依據(jù)。
　　 論文的第一部分即第一章，論述了近年來我國中藥質(zhì)量控制模式的發(fā)展?fàn)顩r，中藥指紋圖譜，現(xiàn)代分析技術(shù)以及化學(xué)計量學(xué)解析分辨技術(shù)和模式識別方法在中藥質(zhì)量控制中的應(yīng)用等內(nèi)容。
　　 第二部分為HPLC-DAD聯(lián)用技術(shù)和相關(guān)化學(xué)計量學(xué)方法用于中藥枳實色譜指紋圖譜的研究(第二章和第三章)。其中，第二章詳細(xì)地闡述了枳實中黃酮類成分的高效液相

3、指紋圖譜研究。內(nèi)容主要包括樣品提取條件和色譜分離條件的優(yōu)化；成分分析，尤其是活性化合物的定性定量分析；首次將直觀推導(dǎo)式演進(jìn)特征投影法(heuristicevolving latent projections，HELP)用于枳實二維液相色譜指紋圖譜中重疊色譜峰的解析；相似度比較分析法(Similarity comparative analysis，SCA)用于12批枳實的分析等。第三章在第二章的基礎(chǔ)上將化學(xué)模式識別方法--主成分分析法(P

4、rincipal component analysis，PCA)和聚類分析法(Hierarchical clustering analysis，HCA)用于不同來源的38個枳實樣本的色譜指紋圖譜研究，對兩類樣本的指紋圖譜的共有模式及可疑樣本的指紋圖譜進(jìn)行比較分析，對活性化合物進(jìn)行定量分析。發(fā)現(xiàn)，中藥(材)由于來源復(fù)雜(如產(chǎn)地)、采集時間、炮制方法、儲存條件、儲存年限等不同，使得其所含有的化學(xué)物質(zhì)在種類和含量上(特別是活性化合物的含量)存

5、在較大差異，建議有關(guān)部門應(yīng)趁早采取措施，規(guī)范藥材中那些已明確藥理作用的活性化合物的測定方法和含量指標(biāo)；對中藥材進(jìn)行分類研究時，以完整的色譜指紋圖譜數(shù)據(jù)做輸入變量比以少數(shù)主要色譜峰的峰面積做輸入變量更能彰顯樣本所包含的化學(xué)物質(zhì)的全部信息及發(fā)現(xiàn)可疑樣本。研究表明，將化學(xué)計量學(xué)方法與中藥指紋圖譜研究相結(jié)合是科學(xué)的、全面的，有利于中藥質(zhì)量控制。
　　 第三部分為三種化學(xué)計量學(xué)分辨方法用于藥對紫蘇-藿香揮發(fā)油成分的分析(第四章)。在這一部

6、分中，詳細(xì)地論述了三種化學(xué)計量學(xué)分辨方法--交替移動窗口因子法(Alternative moving windowfactor analysis，AMWFA)、直觀推導(dǎo)式演進(jìn)特征投影法(HELP)和選擇性離子分析法(Selective ion analysis，SIA)；首次同時運用上述三種分辨方法解析藥對紫蘇-藿香及其單味藥揮發(fā)油成分的GC-MS數(shù)據(jù)；此外，計算程序升溫保留指數(shù)(Temperature-programmedretent

7、ion indices，PTRIs)，用來輔助化合物的定性分析。所獲結(jié)果表明，綜合運用此三種化學(xué)計量學(xué)分辨方法能比較全面地對中藥的揮發(fā)油成分進(jìn)行解析，鑒定出更多的組份，使定性定量分析更準(zhǔn)確。比較分析藥對及其單味藥的揮發(fā)油成分，發(fā)現(xiàn)藥對紫蘇-藿香的揮發(fā)油成分的總數(shù)目略小于兩個單味藥的揮發(fā)油成分的數(shù)目之和，藥對揮發(fā)性成分中的主要成分均來自兩單味藥。所得結(jié)果為探索該藥對的藥理作用及其與單味藥的化學(xué)成分的關(guān)系提供理論基礎(chǔ)，為復(fù)方中藥研究提供新思

8、路。
　　 第四部分為直觀推導(dǎo)式演進(jìn)特征投影法(HELP)用于不同藥用部位的厚樸揮發(fā)油成分的分析(第五章)。首次利用HELP法對湖南產(chǎn)凹葉厚樸的不同藥用部位(干皮、枝皮和根皮)的揮發(fā)油成分的GC-MS數(shù)據(jù)進(jìn)行解析。同時，計算程序升溫保留指數(shù)(PTRIs)，提高定性分析的可靠性。結(jié)果：從厚樸干皮、枝皮和根皮的揮發(fā)油成分中分別定性出90，82和76種化合物，三者共有組分50個；首次在該藥材的揮發(fā)油成分中同時定性、(半)定量分析了桉油

9、醇的三種同分異體(α-，β-和γ-)；比較分析表明，厚樸干皮、根皮和枝皮的揮發(fā)油成分存在一定的相似性和差異性。本部分內(nèi)容為厚樸藥材資源的合理使用及藥理藥效研究提供參考。
　　 第五部分為直觀推導(dǎo)式演進(jìn)特征投影法(HELP)和交互移動窗口因子分析法(AMWFA)用于化濕藥揮發(fā)油成分的分析(第六章)。運用HELP法和AMWFA法，首次對五種常用化濕藥(砂仁、蒼術(shù)、藿香、佩蘭和厚樸)的揮發(fā)油成分的GC-MS數(shù)據(jù)進(jìn)行比較分析，利用程序升