馴鹿狂蠅COI基因分析及馴鹿狂蠅蛆病對宿主機體的影響.pdf

1、馴鹿狂蠅蛆(Cephenemyia trompe)是馴鹿的一個主要寄生蟲病病原，感染馴鹿狂蠅蛆病的馴鹿往往消瘦，抗病性差，加上自然環(huán)境等因素造成該病呈發(fā)展蔓延趨勢，每年給我國的馴鹿養(yǎng)殖業(yè)帶來了很大的經(jīng)濟損失。目前馴鹿狂蠅蛆病的研究已經(jīng)取得了很大的進步，但是對其種屬鑒定、病理變化、免疫機能、內(nèi)分泌變化、應(yīng)激能力等還處于空白。所以本次實驗針對馴鹿狂蠅同源性、感染后機體的變化等多方面進行研究，為進一步研究和有效消滅馴鹿狂蠅蛆病奠定基礎(chǔ)。

2、 本實驗針對馴鹿狂蠅病原、30頭馴鹿狂蠅蛆自然感染馴鹿和30頭健康馴鹿進行研究。利用分子生物學(xué)手段對馴鹿狂蠅線粒體細胞色素氧化酶COI基因進行深入分析，進行同源性比較，并繪出NJ進化樹；對馴鹿狂蠅蛆感染馴鹿進行了病理剖解，進行了病理組織學(xué)觀察和超微病理學(xué)觀察；利用ELISA方法對機體補體系統(tǒng)(C3、C4)進行研究；利用ELISA方法對機體總IgG和特異性lgG進行研究；利用ELISA方法和放射性免疫方法對細胞因子IL-12、IFN-Y

3、和TNF-α進行研究；利用流式細胞儀Annexin V-FITC和PI雙染色發(fā)對淋巴細胞調(diào)亡進行研究；利用放射性免疫法對皮質(zhì)醇、T3、T4和TSH進行研究；利用分光光度法對NO、SOD、MDA、GSH-Px和T-AOC氧化應(yīng)激進行研究。 結(jié)果顯示:馴鹿狂蠅成蟲和Ⅲ齡幼蟲相似性為97％，馴鹿狂蠅和鹿咽狂蠅、駝鹿狂蠅、羊狂蠅、馬鼻狂蠅之間相似性為88％；病理組織學(xué)和超微病理學(xué)觀察到鼻粘膜有大量上皮細胞和淋巴細胞脫落，炎癥明顯；馴鹿狂

4、蠅蛆感染馴鹿與健康馴鹿之間的總IgG抗體差異顯著(P<0.01)，感染組產(chǎn)生了一定的針對幼蟲的特異性IgG抗體(OD=0.464±0.128)；馴鹿狂蠅蛆感染馴鹿體內(nèi)C3、C4均顯著升高(P<0.01):馴鹿狂蠅蛆感染馴鹿體內(nèi)的IL-12、IFN-Y和TNF-α顯著低予健康馴鹿(P<0.01)；馴鹿狂蠅蛆感染馴鹿外周血淋巴細胞調(diào)亡率顯著高于健康馴鹿(P<0.01);馴鹿狂蠅蛆感染馴鹿血清T3、T4顯著低于健康馴鹿(P<0.01)，馴鹿狂

5、蠅蛆感染馴鹿血清TSH顯著高于健康馴屁(P<0.01)，馴鹿狂蠅蛆感染馴鹿血清皮質(zhì)醇含量顯著高于健康馴鹿(P<0.01)；馴鹿狂蠅蛆感染馴鹿血清的NO、SOD、GSH-Px和r-AOC。均顯著低于健康馴鹿(P<0.01)，馴鹿狂蠅蛆感染馴鹿血清的MDA顯著高于健康馴鹿(P<0.01)。 實驗證明了馴鹿狂蠅與其它種屬的狂蠅有著不同種屬特異性，馴鹿狂蠅蛆對馴鹿機體造成了炎癥加劇，免疫力降低，機體的代謝水平下降，抗應(yīng)激能力下降。進一步