基于混合自組裝和超支化化合物膜的壓電免疫傳感器.pdf

1、由于壓電免疫傳感器的操作簡便、靈敏度高、價(jià)廉、無污染等特點(diǎn)，使其在生物學(xué)和環(huán)境分析等領(lǐng)域逐步得到了應(yīng)用。但是如何增加抗體或抗原的吸附量，提高傳感器的靈敏度和重現(xiàn)性以及降低傳感界面的非特異性吸附，使壓電免疫傳感器能夠在臨床檢測方面得到應(yīng)用，仍然是當(dāng)前研究的熱點(diǎn)。本文基于實(shí)驗(yàn)室先前的工作，結(jié)合納米金混合自組裝膜、電聚合膜和超支化化合物，提出了生物分子新的固定化方法，并以此構(gòu)建了幾種新型的壓電免疫傳感器，具體內(nèi)容如下： (1)研究結(jié)果

2、表明在納米金表面自組裝巰基混合膜，不僅能夠提高生物分子的固定量，而且能很好地抵制非特異性吸附。但是，一般在納米金表面組裝的是長鏈巰基化合物，當(dāng)長鏈巰基化合物在納米金表面組裝的時(shí)候可能發(fā)生彎曲、纏繞的現(xiàn)象；而且整個(gè)過程是通過層層自組裝完成的，這些都會影響生物活性組分的固定。據(jù)此，本文提出了先將納米粒子表面組裝一層短鏈巰基化合物的混合膜(半胱胺，巰基已醇)，再將被混合膜修飾了的納米金粒子組裝到被巰基丙酸修飾的晶振金電極上(用N-乙基-N￠-

3、(3-二甲氨基丙基)碳二亞胺EDC、N-羥基琥珀酰亞胺NHS活化羧基)的新方法，基于此方法研制了甲狀腺素T4壓電免疫傳感器(第2章)。 (2) 提出了一種結(jié)合酪胺電聚合膜和納米金為界面的甲狀腺激素壓電免疫傳感器(第3章)。先在晶振金電極表面電聚合一層酪胺聚合膜，然后通過聚酪胺一端的氨基和納米金間的作用力在聚合膜表面自組裝一層納米金，再在納米金上固定T4抗體，研制的傳感器實(shí)現(xiàn)了對T4的檢測?？疾炝艘恍?shí)驗(yàn)條件，如免疫反應(yīng)時(shí)間，抗體

4、濃度等對傳感器響應(yīng)性能的影響。經(jīng)過測定該傳感器對T4具有很好的線性響應(yīng)，并將此傳感器與采用戊二醛交聯(lián)法和半胱胺吸附界面的傳感器進(jìn)行了比較。 (3) 通過超支化化合物(HB)和殼聚糖體系實(shí)現(xiàn)金標(biāo)抗體在石英晶振上的固定，制得的壓電型免疫傳感器，用于人 IgG(hIgG) 的檢測(第4章)。首先在晶振表面上自組裝一層半胱胺，再將被活化了的超支化化合物(HB)通過化學(xué)鍵的鍵合作用連接到晶振表面，由于它的三維立體結(jié)構(gòu)，得到一帶有大量負(fù)電荷

5、晶振表面。通過靜電作用將殼聚糖分子連接到晶振上用于固定納米金標(biāo)記的抗體，實(shí)現(xiàn)對hIgG的檢測。結(jié)果表明，所制備的傳感器操作簡便，選擇性好，頻率響應(yīng)大。 (4) 將超支化合物(HB)和殼聚糖在EDC和NHS活化下形成混合液。將石英晶體金電極浸入HB和殼聚糖的混合液中進(jìn)行自組裝，使在晶振表面形成一帶有氨基和羧基基團(tuán)的傳感界面，通過靜電吸附作用吸附蛋白A分子從而實(shí)現(xiàn)抗體分子的定向固定化。所制備的壓電免疫傳感器具有操作簡便，響應(yīng)信號大，