基于MHCF-GNPs膜的無試劑電化學(xué)免疫傳感器研究.pdf

1、鐵氰化物(MHCF)屬于無機(jī)聚合物，其空間結(jié)構(gòu)類似沸石，具有獨(dú)特的穩(wěn)定性、電催化性能及良好的電子傳遞能力，因而引起廣大電化學(xué)工作者的高度重視，并將其廣泛應(yīng)用于生物傳感器的研究中；而納米金(GNPs)具有優(yōu)良的電學(xué)、磁學(xué)、光學(xué)性質(zhì)以及優(yōu)越的生物相容性，在生化免疫分析、電化學(xué)、生物醫(yī)藥以及臨床診斷等領(lǐng)域越來越顯示其重要的作用，本文旨在采用電化學(xué)沉積法在ITO表面制備GNPs膜和MHCF膜，以獲得電化學(xué)響應(yīng)好、抗體負(fù)載量大、穩(wěn)定性強(qiáng)的無試劑電

2、化學(xué)免疫傳感器。主要工作分為兩個(gè)部分： 第一部分，利用電沉積技術(shù)將GNPs和電子媒介體普魯士藍(lán)(PB)膜依次修飾到ITO電極上，GNPs膜不但可以促進(jìn)PB膜的電子傳遞能力，且可以提高PB膜的可逆性及穩(wěn)定性；為了進(jìn)一步改善PB膜的性能，選用一種帶正電荷的兩親性聚合物微乳液(PDS)覆蓋到PB膜上，既防止了PB膜的滲漏，又促進(jìn)了電子的傳遞，最后利用吸附性能強(qiáng)、生物相容性好的金溶膠將羊抗鼠抗體(Anti-MIgG)吸附固定在修飾電極表

3、面，從而制得基于PDS/PB/GNPs膜的無試劑電化學(xué)免疫傳感器。用鐵氰化鉀探針分子對(duì)PDS膜的性能進(jìn)行考察，采用循環(huán)伏安法考察電極修飾過程中GNPs對(duì)PB膜性能的影響、PDS膜對(duì)PB膜性能的影響以及免疫反應(yīng)條件的優(yōu)化(孵育時(shí)間、孵育溫度等)。并將該傳感器成功應(yīng)用于健康人空白血漿中鼠抗原回收率的測(cè)定，最后對(duì)該傳感器的再生性能進(jìn)行了一定的研究。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，GNPs膜作為沉積PB膜的基底，不但可以促進(jìn)PB膜的電子傳遞，且提高了PB膜的可逆

4、性及穩(wěn)定性；在PDS膜的作用下，PB膜的穩(wěn)定性及峰電流均有較大增加；在pH=6.0的PBS中有良好的電化學(xué)響應(yīng)，在最佳實(shí)驗(yàn)條件：pH=6.0的PBS、孵育時(shí)間為30min、孵育溫度為37℃，該免疫傳感器對(duì)鼠抗原(MIgG)有靈敏的響應(yīng)及良好的線性關(guān)系，其響應(yīng)范圍是5～200ng/mL，可再生使用4次。 第二部分，采用電沉積的方法將粒徑均勻、性能穩(wěn)定的GNPs和電子媒介體鐵氰化鈷(CoHCF)膜依次修飾到ITO電極上，GNPs能夠

5、改善CoHCF膜的性能，使得CoHCF膜更加均勻穩(wěn)定，最后用明膠(Gel)將抗體修飾到電極表面，得到基于Gel+Anti-MIgG/CoHCF/GNPs膜無試劑電化學(xué)免疫傳感器，采用循環(huán)伏安法考察固定在電極表面的Anti-MIgG與MIgG之間的免疫反應(yīng)以及條件(孵育時(shí)間、孵育溫度等)。實(shí)驗(yàn)表明，GNPs膜作為沉積CoHCF膜的基底，對(duì)CoHCF膜的性能有很大改善，如電子傳遞能力、穩(wěn)定性、均勻有序性等；在pH=7.0的PBS中，基于Co