三嵌段共聚物mPEG-PLGA-mPEG納米粒的制備及其體外生物學(xué)研究.pdf

1、在過去的幾十年里，將生物可降解的聚合物納米粒發(fā)展成為高效的藥物釋放體系引起人們的廣泛興趣?？缮锝到獾木酆衔锛{米粒作為藥物輸送載體有很多優(yōu)勢，如可控釋、靶向等。但是，由于聚合物納米粒經(jīng)靜脈給藥后，數(shù)秒或數(shù)分鐘內(nèi)會被內(nèi)皮網(wǎng)狀系統(tǒng)清除而無法普遍應(yīng)用。為了克服這一缺點，越來越多的研究者引入親水性組分聚乙二醇（PEG）對聚合物進行修飾，以避免其被內(nèi)皮網(wǎng)狀系統(tǒng)攝取。聚乙二醇的引入可以影響聚合物納米粒的生物相容性，進而會影響藥物的釋放、體內(nèi)分布等行

2、為。 乳酸／羥基乙酸共聚物（PLGA）是一種具有優(yōu)良的生物相容性及生物可降解性的聚合物，PLGA在體內(nèi)代謝最終產(chǎn)物是CO<,2>和H<,2>O，中間產(chǎn)物乳酸也是體內(nèi)正常糖代謝的產(chǎn)物，所以不會在重要器官聚集。PLGA被美國FDA批準(zhǔn)作為藥用輔料，已廣泛應(yīng)用于藥物緩控釋系統(tǒng)和納米粒的制備。本實驗室通過開環(huán)共聚方法合成了具有不用組分的丙交酯／乙交酯／聚乙二醇（LA/GA/PEG）共聚物（PLGA-PEG），進一步偶聯(lián)制得三嵌段共聚物（

3、mPEG-PLGA-mPEG，簡稱PELGE），并將其用于了化學(xué)藥物和基因藥物納米給藥系統(tǒng)的研究，結(jié)果表明該材料用于納米給藥系統(tǒng)具有一定的應(yīng)用前景。本文采用不同組分的PELGE制備了隱形納米粒，系統(tǒng)的考察了該類納米粒的理化特性（粒徑，表面電位），體外生物學(xué)指標(biāo)（血漿蛋白吸附、巨噬細胞吞噬）以及材料的血液相容性，以闡明該類納米粒長循環(huán)規(guī)律。 首先，以同課題組優(yōu)化的該材料載藥納米粒處方工藝為參考，以PELGE、PLGA、F68為載體

4、材料，采用復(fù)乳法制備了PEG含量不同的空白PELGE納米粒以及核心材料PLGA中LA／GA不同的空白PELGE納米粒，并對其理化性質(zhì)如粒徑、zeta電位等進行了考察。 其次，考慮到納米粒與血漿蛋白相互作用對其體內(nèi)行為的影響，我們采用了SDS-PAGE電泳技術(shù)，分析了該類納米粒的血漿蛋白吸附情況，并以小鼠巨噬細胞RAW264.7為模型，采用化學(xué)發(fā)光法分析該類納米粒的吞噬情況。結(jié)果表明，PEG含量的增加有助于減少血漿蛋白吸附和巨噬細

5、胞的吞噬。PEG含量約為10％左右時，納米粒會吸附最少的血漿蛋白，而且被巨噬細胞吞噬的也最少，當(dāng)PEG含量超過10％以后，蛋白吸附和細胞吞噬都不會再有顯著的減少。 最后，為了評價材料的血液相容性，我們以硅化玻璃試管為陰性對照，未硅化的試管為陽性對照，參照國際標(biāo)準(zhǔn)（ISO10993）和《中華人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn)GB/T 16886醫(yī)療器械生物學(xué)評價》方法進行了體外評價實驗。試驗包括溶血率實驗，血小板黏附實驗，動態(tài)凝血時間實驗，凝血時