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1、微衛(wèi)星序列作為研究物種進(jìn)化的重要工具已經(jīng)越來越被人們重視,許多串聯(lián)重復(fù)序列在基因組中具有重要的功能。目前,普遍認(rèn)為具有3個(gè)作用:一是組成開放閱讀框的一部分;二是參與基因組的調(diào)節(jié)活動(dòng),(GA)n/(CT)n位于基因的啟動(dòng)子區(qū)域,是基因表達(dá)調(diào)節(jié)機(jī)制中的一個(gè)重要組成部分;三是組成染色體的脆性位點(diǎn)。基因組是一個(gè)復(fù)雜的信息儲(chǔ)存系統(tǒng)在基因組系統(tǒng)結(jié)構(gòu)中,重復(fù)序列作為主要的決定因素影響著DNA復(fù)制、染色體分離、基因表達(dá)等重要生命活動(dòng)。對(duì)串聯(lián)重復(fù)序列生物
2、功能的研究還處于起步階段,鑒于微衛(wèi)星序列在基因組中的重要作用,有必要對(duì)微衛(wèi)星序列的進(jìn)化以及生物學(xué)功能進(jìn)行深入地研究。大量的研究結(jié)果表明:微衛(wèi)星DNA(SSR)在物種多態(tài)性檢測(cè)方面具有其獨(dú)特優(yōu)勢(shì),已廣泛應(yīng)用于生物遺傳多樣性研究、親緣關(guān)系分析、品種鑒定、指紋圖譜構(gòu)建、主要性狀基因的定位、遺傳圖譜及系譜分析和分子標(biāo)記輔助選擇育種等多個(gè)方面。 盡管SSR的應(yīng)用前景非常廣闊,但從基因組文庫中開發(fā)某一物種SSR標(biāo)記是非常昂貴和費(fèi)時(shí)的,因?yàn)樗?/p>
3、要求從已知的序列中開發(fā)合適的多態(tài)性信息位點(diǎn),這一點(diǎn)不同于其它分子標(biāo)記。上個(gè)世紀(jì)90年代人們就提出某一物種的開發(fā)出來的微衛(wèi)星引物能否在其他相近物種中轉(zhuǎn)移使用,研究發(fā)現(xiàn)微衛(wèi)星DNA的側(cè)翼序列比較保守,某一物種的微衛(wèi)星引物可在相近物種中使用,這可以減少獲取微衛(wèi)星的工作量.在小麥族中前人成功的將小麥微衛(wèi)星引物應(yīng)用于黑麥、簇毛麥、山羊草等物種的研究中。這種簡(jiǎn)單有效的方法增加了相關(guān)物種的微衛(wèi)星引物數(shù)量,通過這種方法還可以獲得更多的種屬特異分子標(biāo)記。
4、這樣便可以為近緣物種的研究節(jié)約大量的成本。有利于探明近緣物種間的遺傳同源性以及物種起源等生命科學(xué)領(lǐng)域中的重要問題。 本研究利用小麥微衛(wèi)星引物對(duì)小麥近緣屬中遺傳多樣性,特異分子標(biāo)記,以及近緣屬中的微衛(wèi)星序列的變異與進(jìn)化進(jìn)行了研究,得到如下主要研究結(jié)果: 1.利用小麥微衛(wèi)星DNA分析小麥近緣物種植物的遺傳多樣性利用218對(duì)小麥SSR引物對(duì)小麥及其近緣種共22個(gè)材料進(jìn)行PCR擴(kuò)增。從中篩選到39對(duì)多態(tài)性高、重復(fù)性好的引物,這些
5、引物可在供試材料中檢測(cè)出213個(gè)等位基因變異,平均每個(gè)位點(diǎn)可檢測(cè)到5.4個(gè)等位基因。位點(diǎn)多態(tài)性信息量(PIC)變幅為0.38~0.89,平均為0.57。NTSYS軟件的分析結(jié)果表明:22份材料的遺傳相RM317與突變性狀存在連鎖關(guān)系。用這3個(gè)標(biāo)記對(duì)F2群體的所有隱性單株(432株)進(jìn)行掃描,結(jié)果證實(shí)上述3個(gè)標(biāo)記與VR1表現(xiàn)明顯的連鎖,且位于基因一側(cè),遺傳距離分別為3.4CM,2.6CM,2.4CM。結(jié)合導(dǎo)致不育的原因,將該基因命名為VR
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