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1、骨質(zhì)疏松癥(Osteoprosis,OP)是一種以因骨量下降和骨的微細(xì)結(jié)構(gòu)破壞,從而導(dǎo)致骨的脆性增加,進(jìn)而容易發(fā)生骨質(zhì)疏松性骨折的全身性骨病。中醫(yī)認(rèn)為腎虛是骨質(zhì)疏松癥的發(fā)病關(guān)鍵,脾胃氣虛是骨質(zhì)疏松癥的重要病機(jī),血瘀是骨質(zhì)疏松癥的病理產(chǎn)物和促進(jìn)因素。中藥骨筋寶湯補(bǔ)腎填精,活血化瘀,對(duì)骨質(zhì)疏松癥有預(yù)防和治療的作用。
目的:實(shí)驗(yàn)通過構(gòu)建去卵巢大鼠骨質(zhì)疏松模型,并對(duì)其進(jìn)行骨筋寶湯管喂治療,以評(píng)估中藥骨筋寶湯對(duì)繼發(fā)性骨質(zhì)疏松癥的治療作用
2、,并初步探討該中藥對(duì)骨質(zhì)疏松癥的辯證治療機(jī)制。
方法:將30只成年雌性SD大鼠隨機(jī)分配為三個(gè)實(shí)驗(yàn)組,每組10只,即:骨筋寶湯組、模型組、假手術(shù)組。予以適應(yīng)性喂養(yǎng)一周后,其中骨筋寶湯組:給予雙側(cè)卵巢切除術(shù)(OVX)8周后,管喂骨筋寶湯8周;模型組:給予單純雙側(cè)卵巢切除術(shù)(OVX)觀察16周;假手術(shù)組:行假性卵巢切除術(shù)(SHAM組)。三組大鼠均給予低鈣飲食,保持同樣的飼養(yǎng)溫度、濕度、光照等條件。檢測(cè)指標(biāo)及方法:動(dòng)物飼養(yǎng)16周后,處
3、死大鼠,采集大鼠股骨,脛骨及腰椎骨骼標(biāo)本。通過組織化學(xué)方法處理后,用彩色圖像分析儀,鏡下觀察各實(shí)驗(yàn)組大鼠脛骨干骺端骨小梁形態(tài)差異、骨小梁面積及骨小梁面積比的變化。使用雙能X線骨密度儀測(cè)定各實(shí)驗(yàn)組大鼠全身(頭顱除外)及腰椎、股骨頸、股骨、脛骨上段等區(qū)域的骨密度變化。X線平片觀察并測(cè)量各實(shí)驗(yàn)組大鼠股骨中段形態(tài)及皮質(zhì)厚度與髓腔直徑之比變化。對(duì)各實(shí)驗(yàn)組大鼠股骨作三點(diǎn)彎曲實(shí)驗(yàn),第五腰椎作腰椎壓縮載荷實(shí)驗(yàn)測(cè)定其生物力學(xué)性能變化。以評(píng)價(jià)骨筋寶湯對(duì)繼發(fā)
4、性骨質(zhì)疏松的治療作用。統(tǒng)計(jì)學(xué)處理:各組大鼠的實(shí)驗(yàn)結(jié)果數(shù)據(jù)都取組內(nèi)均數(shù),并使用means±SEM表示,數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理都用SPSS12.0軟件處理。組間差異用方差分析來檢驗(yàn)各組間是否有顯著性差異,當(dāng)有組間具有顯著性差異時(shí),再對(duì)組內(nèi)各均數(shù)作多參數(shù)t檢驗(yàn)以證實(shí)各均數(shù)之間是否有顯著性差異。
結(jié)果:
1.脛骨干骺端骨小梁形態(tài)計(jì)量學(xué)變化:鏡下觀察,模型組骨小梁明顯萎縮,細(xì)小,分布稀疏散亂,骨小梁間距增大,多數(shù)骨小梁走行有中斷,皮質(zhì)
5、骨變薄,骨小梁面積及其比例均出現(xiàn)下降。與模型組相比,假手術(shù)組的骨小梁表面光滑,均勻分布,規(guī)則排列,未見有中斷的骨小梁。皮質(zhì)骨形態(tài)較致密,內(nèi)外表面較光滑。骨筋寶湯組與模型組相比較,骨小梁明顯增粗,分布均勻程度及排列改善,但與假手術(shù)組相比較,骨小梁仍然細(xì)小,骨小梁絕對(duì)面積、骨小梁面積比例都明顯優(yōu)于模型組,差異有顯著性(P<0.01)。
2.全身(顱骨除外)骨密度變化:雙側(cè)卵巢切除術(shù)后8周,模型組大鼠的骨密度明顯下降,其中全身骨密度
6、(顱骨除外)下降達(dá)19%以上,差異具有顯著性(P<0.01),證明大鼠卵巢切除8周后繼發(fā)性骨質(zhì)疏松模型已建立。骨筋寶湯組在骨質(zhì)疏松模型建立的基礎(chǔ)上,給予骨筋寶湯管喂8周后,大鼠全身骨密度得到提高,與模型組骨密度比較,差異有顯著性(P<0.01)。
3.股骨全長(zhǎng)X光片及皮質(zhì)/髓腔比值:肉眼觀察各組大鼠股骨全長(zhǎng)X光片,模型組的股骨全長(zhǎng)骨皮質(zhì)變薄,假手術(shù)組股骨全長(zhǎng)骨皮質(zhì)較致密,骨筋寶湯組股骨全長(zhǎng)骨皮質(zhì)厚度低于假手術(shù)組,但與模型組相比
7、,皮質(zhì)厚度有增加。骨筋寶湯組皮質(zhì)/髓腔直徑比值與模型組相比較有增大,差異具有顯著性(P<0.01)。
4.股骨三點(diǎn)彎曲實(shí)驗(yàn)及腰椎壓縮載荷實(shí)驗(yàn):在三組大鼠的股骨三點(diǎn)彎曲實(shí)驗(yàn)及腰椎壓縮載荷實(shí)驗(yàn)中,模型組的股骨及腰椎的最大載荷、最大應(yīng)力、能量吸收數(shù)值均顯著降低,骨筋寶湯組在治療后股骨及腰椎的生物力學(xué)性能均得到明顯改善,與模型組比較差異有顯著性(P<0.01),但仍較假手術(shù)組(SHAM組)偏低。
結(jié)論:課題應(yīng)用脛骨干骺端骨小
8、梁形態(tài)計(jì)量,全身骨密度測(cè)定,X平片測(cè)量皮質(zhì)/髓腔比值,股骨三點(diǎn)彎曲實(shí)驗(yàn)及腰椎壓縮實(shí)驗(yàn)等實(shí)驗(yàn)指標(biāo)評(píng)價(jià)骨筋寶湯組大鼠骨質(zhì)疏松癥的改善程度,旨在全面評(píng)價(jià)骨筋寶湯對(duì)增加骨密度,促進(jìn)成骨,改善骨骼生物力學(xué)性能以治療骨質(zhì)疏松的作用。
1.假手術(shù)組和實(shí)驗(yàn)?zāi)P徒M在四項(xiàng)實(shí)驗(yàn)結(jié)果上的差異證實(shí)了雌性激素缺乏是引起繼發(fā)性骨質(zhì)疏松的重要因素之一。
2.骨筋寶湯能夠改善骨小梁質(zhì)量和排列,全面提高全身骨密度,提高骨骼生物力學(xué)性能,改善骨質(zhì)疏松,預(yù)
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